材料：质粒DNA指数生长的真核细胞PEI（聚乙烯亚胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI储存液（100μM）：称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm滤膜过滤，储存于4℃备用。1×HBS（pH7.4）：将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水，加入20ml1M的HEPES，调pH值到7.4，定容至1L，过滤（0.2μm滤膜）后储存于4℃备用。方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。更多产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！用PEI转染试剂时出现沉淀什么原因?低毒性PEI转染试剂病毒产量
注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒）。通过260nm光吸收测定DNA浓度，260nm/280nm比值确定DNA纯度（比值应该在1.8~2.0的范围之内）。如有可能，请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。细胞条件：使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞，请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者78bio公司血清培养细胞。近期还有PEIfree申请活动，欢迎咨询上海曼博生物！欢迎关注我们的公众号Mine-bio，回复“PEI转染试剂”即可领取！国产PEI转染试剂溶解度PEI转染试剂对复合物孵化的时间是有要求的，一般建议5~20分钟之间.
对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。更多关于PEI转染试剂相关产品问题，欢迎咨询上海曼博生物！也欢迎关注我们的公众号：Mine-bio查看更多技术文章！回复关键词“PEI申请”可申请试用装！
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用PEI转染时，一般和DNA的比例是?低毒性PEI转染试剂病毒产量
PEI在于可以应用于体内试验。当初试验经费很有限，被逼无奈只能放弃脂质体2000，选择PEI，以至于相当长的时间内，转染试验都不顺利。下面是几点关于PEI转染的注意要点：1.PEI的使用量可以参照脂质体2000的说明书，所用质粒尽量去内2.转染时，一定要把PEI+DMEM加入到质粒+DMEM中，顺序不可错，轻微混匀，静止20min3.转染后4小时，一定要换液！换含有FBS的完全培养液！因为PEI对细胞毒性太大4.如果后续试验涉及到稳定筛选，建议把血清浓度适当提高。PS：事实证明，PEI是可行的，已经做出稳定细胞系了。更多关于Polysciences PEI转染试剂相关产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！也欢迎关注我们的公众号：Mine-bio ，私信回复关键词“PEI申请“即可申请PEI试用装！低毒性PEI转染试剂病毒产量
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【详情】对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显...
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【详情】特别提醒1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前...
【详情】Polysciences 转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）的...
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【详情】产品特点：PEIMAX40K是线性聚乙烯亚胺盐酸盐形式（LinearPolyethylenimine...
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