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南京细胞支原体预防试剂多少钱

细胞培养过程中如果发现支原体污染，可以采取以下一些方法尝试去除污染： 1. 抗*素治*：使用针对...

支原体基本参数

品牌
世途科生物
型号
CM0001

支原体企业商机

细胞培养过程中如果发现支原体污染，可以采取以下一些方法尝试去除污染：

1. 抗*素治*：使用针对支原体有效的抗*素，如四环素类、大环内酯类、氟喹诺酮类等。根据搜索结果，可以加入高浓度抗*素进行冲击治*，例如庆大霉素 200ug/ml，四环素10ug/ml，卡那霉素50ug/ml，并维持24-48小时后再换入常规培养液。

2. 加温处理：支原体不耐热，可以将细胞置于41°C中处理5-10小时以杀灭支原体。但需注意，高温也可能对细胞造成伤害，因此需要预先确定对细胞影响较小的处理时间。

3. 使用支原体清除剂：市场上有专门的支原体清除剂，按照产品说明使用。

4. 使用支原体清*培养基：如Procell支原体清*培养基，这类产品含有清*支原体的特殊成分，可以抑制支原体生长并挽救珍贵细胞。

5. 物理方法：一些实验室采用过滤的方法，使用0.22μm或更小孔径的滤膜过滤培养基和试剂，以阻止支原体的侵入。

6. 细胞传代：在一些情况下，通过细胞传代可能有助于减少支原体的污染程度。

支原体去除的实验步骤？南京细胞支原体预防试剂多少钱

一步法快速支原体检测的原理主要基于等温扩增技术，这是一种在恒定温度下进行的核酸扩增方法。以下是具体的步骤和原理：

1. 等温扩增技术：一步法快速支原体检测试剂盒利用LAMP（Loop-Mediated Isothermal Amplification，环介导等温扩增）技术或类似的等温扩增技术。这些技术允许在恒定温度下进行DNA的快速扩增，通常在60-65°C之间。

2. 特异性引物：该方法使用设计好的特异性引物，这些引物靶向支原体DNA的保守区域。引物的设计确保了扩增过程的特异性，从而减少非目标序列的扩增。

3. 快速扩增：在适宜的条件下，等温扩增技术可以在15至60分钟内实现高达10^9至10^10倍的核酸扩增，从而快速检测出支原体的存在。

4. 颜色变化指示：一步法试剂盒中通常包含有颜色指示剂，当支原体DNA被扩增时，反应液的颜色会发生变化，从而可以通过肉眼直接观察到检测结果。例如，从蓝紫色变为天蓝色，表示样本中存在支原体。

5. 操作简便：一步法支原体检测不需要复杂的设备，通常只需要水浴锅或PCR仪即可完成操作，使得检测过程更加简便快捷。

南京细胞支原体预防试剂多少钱支原体预防的实验步骤？

支原体去除的原理通常涉及以下几个方面：

1. 抗*素作用：使用特定的抗*素制剂来抑制支原体的生长和繁殖。例如，含有喹诺酮类、四环素衍生物类和大环内酯类抗*素的混合制剂，这些抗*素能够抑制支原体的DNA和蛋白合成。

2. 破坏细胞膜：支原体去除剂中的抑菌肽（AMPs）成分通过破坏支原体细胞膜的完整性，导致支原体细胞死亡。

3. 抑制DNA复制：支原体去除剂通过抑制支原体DNA回旋酶活性，有效抑制支原体DNA的复制，从遗传物质着手彻底杀灭支原体。

4. 协同作用：某些支原体去除剂利用抑菌肽（AMPs）和穿膜肽（CPPs）的协同作用来除去支原体，穿膜肽能够帮助抑菌肽更有效地穿透细胞膜，增强其杀灭支原体的能力。

细胞培养中支原体污染的检测方法有多种，以下是一些常用的检测手段：

1. 显微镜检测：通过相差显微镜观察细胞，支原体在细胞表面和细胞之间会呈现为暗色微小颗粒。

2. 荧光染色法：使用荧光染料Hoechst 33258与DNA特异性结合，使支原体的DNA着色，然后在荧光显微镜下观察。染色后的支原体会在细胞周围或附于细胞膜表面显示为亮绿色小点。

3. 电镜检查：使用扫描电镜或透射电镜观察，这是一种简便快速的方法。

4. 聚合酶链反应（PCR）：使用特定的引物对支原体DNA进行扩增，是一种高灵敏度的检测方法。

5. 等温扩增法：基于LAMP技术，室温反应后观察颜色变化确认是否有支原体污染。

支原体检测方法LAMP法的应用。

支原体污染是细胞培养中普遍的问题之一，细胞库中或正在使用的细胞中，支原体的污染率约为15%-35%。并对培养细胞的生理和代谢造成诸多影响：

01/ 争夺营养：支原体的污染会阻碍细胞生长和增殖

02/ 改变蛋白质、RNA 或 DNA 合成的水平

03/ 改变基因表达、细胞信号传导和形态

04/ 损害膜和细胞器

05/ 导致突变和染色体变化

06/ 时间、金钱和有价值的细胞丢失：支原体的污染会导致严重的经济损失以及研究时间损失

07/ 实验结果的不可靠性

08/ 生物安全问题

支原体检测假阴性的原因？南京细胞支原体预防试剂多少钱

支原体及污染方式有哪些？南京细胞支原体预防试剂多少钱

支原体检测中的PCR法和LAMP方法各有其优势和劣势，以下是两种方法的比较：

PCR法

优势:

1.高灵敏度：PCR法可以扩增支原体DNA，具有很高的灵敏度。

2.操作简便：PCR操作相对简单，结果准确，速度快，通常3个小时左右即可得到结果。

3.可靠性：PCR法已成为日常细胞培养维护的可靠方法，是细胞样本库保护细胞的方法。

劣势:

1. 样品量需求：相对于某些快速检测方法，PCR可能需要较多的样品量。

2. 检测周期：尽管PCR法相对快速，但在某些情况下，检测周期可能较长。

LAMP法

优势:

1. 设备简单：只需要一个稳定的恒温环境，如恒温水浴或热拟温器，不需要复杂的温度控制设备。

2. 高特异性：LAMP技术采用多个特异性引物，提供了较高的特异性。

3. 结果可视化：LAMP扩增产物可形成肉眼观察的颜色产物，有助于直接观察扩增结果。

劣势:

1. 引物设计复杂：需要设计多个引物，包括外部引物、内部引物和环引物，引物设计较为复杂。

2. 避免污染：由于没有封闭系统，避免污染造成的假阳性是一个问题。

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