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细胞支原体检测试剂多少钱

支原体污染一旦发生，不仅对细胞培养造成严重影响，甚至可能导致实验结果失真。而且支原体污染在细胞培养实验中相当常见。因...

支原体基本参数

品牌
世途科生物
型号
CM0001

支原体企业商机

支原体污染一旦发生，不仅对细胞培养造成严重影响，甚至可能导致实验结果失真。而且支原体污染在细胞培养实验中相当常见。因此，预防措施是确保细胞培养环境和实验结果可靠性的重要手段。

01/ 良好的无菌技术及实验操作，保证操作不会引入新的污染

02/ 保持实验空间的清洁

03/ 确保从可靠的来源获取细胞，减少不同细胞之间的交叉传染

04/ 防止交叉污染

05/ 减少气溶胶生成

06/ 谨慎使用抗*素

07/ 定期支原体筛查

08/ 丢弃或处理受到支原体污染的细胞

09/ 保持良好的记录

支原体污染和黑胶虫污染有什么区别？细胞支原体检测试剂多少钱

一步法快速支原体检测的原理主要基于等温扩增技术，这是一种在恒定温度下进行的核酸扩增方法。以下是具体的步骤和原理：

1. 等温扩增技术：一步法快速支原体检测试剂盒利用LAMP（Loop-Mediated Isothermal Amplification，环介导等温扩增）技术或类似的等温扩增技术。这些技术允许在恒定温度下进行DNA的快速扩增，通常在60-65°C之间。

2. 特异性引物：该方法使用设计好的特异性引物，这些引物靶向支原体DNA的保守区域。引物的设计确保了扩增过程的特异性，从而减少非目标序列的扩增。

3. 快速扩增：在适宜的条件下，等温扩增技术可以在15至60分钟内实现高达10^9至10^10倍的核酸扩增，从而快速检测出支原体的存在。

4. 颜色变化指示：一步法试剂盒中通常包含有颜色指示剂，当支原体DNA被扩增时，反应液的颜色会发生变化，从而可以通过肉眼直接观察到检测结果。例如，从蓝紫色变为天蓝色，表示样本中存在支原体。

5. 操作简便：一步法支原体检测不需要复杂的设备，通常只需要水浴锅或PCR仪即可完成操作，使得检测过程更加简便快捷。

细胞支原体检测试剂多少钱支原体检测假阴性的原因？

支原体检测实验设计和实验方法需要考虑以下几个关键点：

1. 选择合适的检测方法：根据实验室条件和需求，选择适合的支原体检测方法，如培养法、PCR法、ELISA法、DNA荧光染色法等。

2. 样本的采集与处理：确保样本的采集和处理过程符合无菌操作规范，避免交叉污染。

3. 实验操作的标准化：制定详细的实验操作流程，包括样本接种、培养条件、观察时间点等，以保证实验的可重复性和准确性。

4. 使用适当的培养基：根据支原体的特性选择合适的培养基，如支原体肉汤培养基、精氨酸支原体肉汤培养基等，并确保培养基的灵敏度和特异性。

5. 设置对照组：实验中应包括阳性对照和阴性对照，以验证实验方法的有效性和排除假阳性或假阴性结果。

6. 结果的判定：根据实验方法的不同，设定明确的标准来判定结果，如培养法中观察“荷包蛋”状菌落，PCR法中通过扩增条带的有无来判断。

7. 避免抑制物质的影响：在实验设计中考虑可能存在的抑制物质，并采取适当措施中和或抵消它们的作用。

细胞培养过程中如果发现支原体污染，可以采取以下一些方法尝试去除污染：

1. 抗*素治*：使用针对支原体有效的抗*素，如四环素类、大环内酯类、氟喹诺酮类等。根据搜索结果，可以加入高浓度抗*素进行冲击治*，例如庆大霉素 200ug/ml，四环素10ug/ml，卡那霉素50ug/ml，并维持24-48小时后再换入常规培养液。

2. 加温处理：支原体不耐热，可以将细胞置于41°C中处理5-10小时以杀灭支原体。但需注意，高温也可能对细胞造成伤害，因此需要预先确定对细胞影响较小的处理时间。

3. 使用支原体清除剂：市场上有专门的支原体清除剂，按照产品说明使用。

4. 使用支原体清*培养基：如Procell支原体清*培养基，这类产品含有清*支原体的特殊成分，可以抑制支原体生长并挽救珍贵细胞。

5. 物理方法：一些实验室采用过滤的方法，使用0.22μm或更小孔径的滤膜过滤培养基和试剂，以阻止支原体的侵入。

6. 细胞传代：在一些情况下，通过细胞传代可能有助于减少支原体的污染程度。

支原体检测方法qPCR法的应用。

方法	灵敏度	优势	劣势
培养法	☆☆☆	ü 便捷 ü 便宜 ü 金标准	ü 费劳力 ü 耗时长 ü 需要特定的培养基 ü 特定支原体种类需要特定的培养基
DNA染色 (DAPI or Hoescht)	☆	ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜	ü 可能难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 可能假阳性可能性
间接染色	☆☆☆	ü 迅速 ü 便宜 ü 易检测	ü 费时 ü 需要细胞系指示
ELISA	☆☆	ü 迅速 ü 客观，易判读结果 ü 可以鉴别支原体种属	ü 受抗体限制 ü 价格高
免疫染色	☆☆	ü 迅速 ü 可检测支原体种属 ü 价格略高	ü 可检测的支原体种属有限
放射自显影	☆☆	ü 迅速	ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 费劳力
生物发光	☆☆	ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜	ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属
PCR	☆☆☆	ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特异性	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA
Real-Time PCR	☆☆☆	ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特异性 ü 结果可靠 ü 高通量	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA
LAMP	☆☆	ü 便捷 ü 无需DNA提取 ü *需10min左右的实验操作时间 ü 具有特异性 ü 高通量	ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性支原体去除试剂会影响细胞的生长状态嘛？杭州细胞支原体去除试剂现货

支原体污染之后是直接丢弃还是重新培养？细胞支原体检测试剂多少钱

细胞培养中支原体污染的检测方法有多种，以下是一些常用的检测手段：

1. 显微镜检测：通过相差显微镜观察细胞，支原体在细胞表面和细胞之间会呈现为暗色微小颗粒。

2. 荧光染色法：使用荧光染料Hoechst 33258与DNA特异性结合，使支原体的DNA着色，然后在荧光显微镜下观察。染色后的支原体会在细胞周围或附于细胞膜表面显示为亮绿色小点。

3. 电镜检查：使用扫描电镜或透射电镜观察，这是一种简便快速的方法。

4. 聚合酶链反应（PCR）：使用特定的引物对支原体DNA进行扩增，是一种高灵敏度的检测方法。

5. 等温扩增法：基于LAMP技术，室温反应后观察颜色变化确认是否有支原体污染。

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