本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术：近年来，随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了应用，成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中，血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是，由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应物，例如血液中含有血红素，蛋白质，脂肪，抗凝剂等，唾液和口腔拭子含有蛋白质，脂肪，抗凝剂等，使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此，现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA，才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多，传统酚氯仿抽提法，高盐盐析法，模离心柱吸附法，磁珠法，等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞，将血红素物质释放出来，然后离心，清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞，释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。 口腔拭子是一个形状长得跟牙刷很像的拭子。广东鼻咽拭子口腔拭子检测
本发明的特征在于：应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测，主要步骤如下。（1）将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀。（2）将步骤（1）中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，至沉淀完全散开，然后5000g离心30s，弃上清。（口腔拭子样本则无需进行此步骤）。（3）向步骤（2）所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1～2min；室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的基因组DNA；所述的核酸释放剂组成为20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺；所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2～图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。山西医疗口腔拭子检测口腔拭子如果在使用的过程中出现过敏现象，请立即停止使用，严重时请及时就医。
加入20μteinaseK溶液，混匀。加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，在56℃放置14min（期间颠倒混合样品数次），溶液应变清亮，若未完全变清亮，延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇，充分振荡混匀10s，此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm（~13，400×g）离心2min。将吸附柱放置新的，以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液，室温放置2～5分钟，12,000rpm（~13，400×g）离心2min，将溶液收集到离心管中，测定浓度及纯度后，取3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6，本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21～25之间，荧光扩增曲线呈典型的S型。
中文名称： 口腔拭子DNA样本保存管
英文名称： Swab DNA Storage Tube
产品规格： 200μl×20支
发货周期： 1～3天
产品价格： 询价
本产品采用医疗**的聚氨脂海绵为原材料，具有吸液性强、柔软洁净、发尘量低等优点。采样拭子头可折断，使用方便。采用的物料对微生物无危害，能大量地增加样本的采集、释放量，增强样本送检期间的保存效果。能够常温保存口腔拭子DNA长达12个月，其获得的DNA可用来完成各种基因检测及分析实验，如qPCR、NGS、SNP分析。为运输和存储提供方便，并减低其成本。
使用方法：
1．取样前清洁双手，用清水漱口1-2次，去除口腔中的食物残渣，咽尽口腔中剩余的清水。
2．撕开采样棉签外包装。
3．将棉签伸进口腔内，在内侧颊粘膜处反复擦拭20次以上，至棉头已经被唾液充分浸润(应无食物残渣等异物粘附)。
4．打开样本采集管盖，将采样后的棉签放入样本采集管内，沿手柄上的折痕折断手柄。
5．随即盖上样本采集管，完成样品取样。 这款口腔拭子目前非常多的用于疾病筛查，基因检测，分子诊断，HIV采集细胞，BINGDU 微生物等采集。
各种采样拭子供应商【操...医疗采样拭子详细信息新闻more独立包装棉签生产厂家2019/11/041040北京一次性使用***采样管2019/06/年春季CMEF，华晨阳在上海等您2019/05/15500重磅｜CCTV採訪了我們！2018/12/271377我司董事长赴新疆考察2018/12/251290基因检测DNA口腔拭子常规取样方法2018/11/0511835清洁验证的取样方法2018/10/092698一次性采样拭子标准工厂厂家生产2018/09/041261案例more11月24DNA样本采集器DNA唾液样本采集器，口腔拭子DNA样本采集套装，...6月19粪便常温采集保存套装微生物样品常温采集保存套装–粪便/肠道/生殖道/皮...6月19CY-98000唾液采集器彩盒装DNA唾液采集也就是现在流行的基因检测采样，分子...6月19一次性使用基因采样盒基因检测,基因检测采样,DNA采样,唾液采集器的收...公司荣誉行业奖项一览医疗器械生产许可证医疗器械生产许可证医疗器械生产许可证医疗器械生产许可证医疗器械生产许可证医疗器械生产许可证1000+服务超过1000家企业行业医疗，生物，制药。包装后的拭子应贮存在2℃ ～30℃，相对湿度40%～90%的无腐蚀性气体、通风良好、阴凉干燥、清洁的环境中。核酸检测口腔拭子批发
这款口腔拭子拥有新颖的折点设计，让拭子轻松折断并进入管中，更加便于操作。广东鼻咽拭子口腔拭子检测
口腔拭子DNA提取介绍所述iCleanhcy的DNA口腔细胞的试剂盒允许从人口腔拭子的基因组DNA的快速和有效的纯化。
DNA样本准备裂解液后，您可以在使用iCleanhcy不到15分钟纯化DNA技术。根据所使用的DNA纯化试剂盒，可以使用液体处理机器人单独或在自动化系统中处理样品。对于套件预期用途的iCleanhcy设计DNA口腔细胞试剂盒以允许从人颊细胞拭子或来自漱口水/或者唾液采集器手机人体唾液的沉淀细胞中分离以下量的基因组DNA。在加工前，样品可以在4°C下储存长达2周，而DNA产量或质量没有明显损失，不会降解。纯化的基因组DNA适用于下游应用，例如PCR,芯片.iCleanhcy?的DNA归口腔细胞培养基：在150微升的总体积在1-3毫微克/微升的浓度制作的基因组DNA的归一化产率。
iCleanhcy的DNA口腔细胞培养基：纯化的基因组DNA的6微克。重要提示：DNA产量各不相同，取决于几个因素，包括服用拭子的人的技术，供体是高还是低的脱落剂，以及使用的拭子类型。优点使用iCleanhcy的DNA口腔细胞的试剂盒，分离基因组DNA提供了以下优点：使用基于磁珠的技术分离基因组DNA，无需使用危险化学品，离心或真空歧管在样品制备和裂解后不到15分钟内。 广东鼻咽拭子口腔拭子检测
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