目前有 210 +种不同种类的支原体分布于人类、动物、昆虫和植物中,其中 20 +种在细胞培养中被发现为污染物。支原体在实验室中的传播来源多种多样,主要来源包括实验室人员、胎牛血清(FBS)或新生牛血清(NBS)、以及由猪来源的胰蛋白酶溶液。此外,来自其他实验室或商业供应商的细胞培养物、培养基、污染的试剂;非无菌供应品、培养基和溶液;实验室人员;培养箱;液氮;空气颗粒和气溶胶;抗*素的过度使用;细胞培养器皿的不正确密封;以及其他的支原体细胞培养物等都可能成为支原体的传播途径。
杭州细胞支原体去除多少钱什么样的客户需要定期检测支原体污染?
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方法 |
灵敏度 |
优势 |
劣势 |
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培养法 |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 便宜 ü 金标准 |
ü 费劳力 ü 耗时长 ü 需要特定的培养基 ü 特定支原体种类需要特定的培养基 |
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DNA染色 (DAPI or Hoescht) |
☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 可能难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 可能假阳性可能性 |
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间接染色 |
☆☆☆ |
ü 迅速 ü 便宜 ü 易检测 |
ü 费时 ü 需要细胞系指示 |
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ELISA |
☆☆ |
ü 迅速 ü 客观,易判读结果 ü 可以鉴别支原体种属 |
ü 受抗体限制 ü 价格高 |
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免疫染色 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 可检测支原体种属 ü 价格略高 |
ü 可检测的支原体种属有限 |
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放射自显影 |
☆☆ |
ü 迅速 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 ü 费劳力 |
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生物发光 |
☆☆ |
ü 迅速 ü 便捷 ü 便宜 |
ü 难以判读结果 ü 无法鉴别支原体种属 |
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PCR |
☆☆☆ |
ü 便宜 ü 迅速 ü 具有特异性 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
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Real-Time PCR |
☆☆☆ |
ü 便捷 ü 迅速 ü 具有特异性 ü 结果可靠 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 ü 需要提取DNA |
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LAMP |
☆☆ |
ü 便捷 ü 无需DNA提取 ü *需10min左右的实验操作时间 ü 具有特异性 ü 高通量 |
ü 可能假阳性可能性 ü 检测特异性依赖引物特异性 |
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传统荧光显微镜是用光源照射整个样品平面,再获得图像。由于聚焦平面上下的平面也会受到激发产生荧光,图像会扰;同时,同一平面上特征点周围激发的荧光也会干扰特征点的观察。激光扫描共聚焦显微镜采用聚焦后的激光光斑作为照明光源,同时在探测器前引入针空将聚焦光斑外的干扰信号进行过滤,因此提高了图像信噪比,横向分辨率可达200nm左右。此外,激光共聚焦显微镜还可以对样品逐层扫描实现三维成像,以及利用多通道采集图像的功能同时获取不同光谱段的荧光扫描图像。激光扫描共聚焦显微镜与普通荧光显微镜成像对比,激光扫描共聚焦显微镜样机激光共聚焦显微镜可以观察细胞或亚细胞形态结构、鉴定细胞或组织内生物大分子,如:检测蛋白质...