抗原与抗体的制备
抗原与抗体是血清学反应的物质基础。抗原的制备与纯化是获得特异性抗体的先决条件,所得到的抗体又可反过来纯化和检测抗原。
抗原的制备抗原种类繁多,按其物理性状可分颗粒性和可溶性两类。前者指细胞性抗原(包括细菌抗原),其制备较为简便,一般用新鲜细胞以无菌生理盐水或磷酸缓冲液洗涤后配成一定浓度。若系细菌抗原,则取新鲜培养物,经集菌作如下处理,H抗原因不耐热用0.3%~0.5%甲醛处理,O抗原耐热可加热100℃2h去除H抗原后应用。可溶性抗原可以是细胞膜、细胞浆、细胞核及核膜等细胞组成部分,也可能是经细胞分泌至体液中的一些可溶性因子。细胞组成部分常需经过机械或酶解法等破碎、离心获得粗制抗原,并通过选择性沉淀或层析等方法进一步纯化。而体液中(如血清等)的可溶性抗原则可直接用生化手段获得所需成分。有些可溶性抗原jin具有免疫反应性,而无免疫原性,此类抗原尚需与载体偶联方可成为完全抗原。 我们不断推动技术创新,为客户提供先进的微流控产品,帮助他们保持竞争优势。湖南医用微流控产品厂家
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抗原抗体反应的主要影响因素
(一)抗原和抗体浓度、比例抗原和抗体浓度、比例对抗原抗体反应影响比较大,是决定性因素,如前所述。
(二)电解质抗原与抗体特异性结合后,其亲水性减弱,分子表面所带的电荷易受电解质影响而失去,复合物间的排斥力下降,导致第一阶段已形成的可溶性结合物能进一步联结,出现明显的凝集或沉淀现象。试验中常用0.85%的NaCl溶液作为稀释液,以提供适当浓度的电解质。
(三)温度适当的温度可增加抗原与抗体分子碰撞的机会,加速结合物体积的增大,一般而言温度越高,形成可见反应的速度越快,但过高则会使抗原或抗体变性失活,影响试验结果。一般在37℃下进行试验,但也有些抗原抗体在4℃下进行反应较好。
(四)酸碱度pH过高或过低都将直接影响抗原或抗体的理化性质。例如,当pH降至3.0左右时,因接近细菌抗原的等电点,细菌表面蛋白或其他基团所带的电荷消失,其相互间的排斥力丧失而导致非特异性酸凝集,影响试验的可靠性。
生化分析仪按结构和原理分类(1)连续流动式(管道式)连续流动式分析仪指测定项目相同的各待测样本与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这类仪器一般可分为空气分段系统式和非分段系统式。空气分段系统是指在吸入管道的每一个样品、试剂以及混合后的反应液之间,均用一小段空气隔开,而非分段系统是靠试剂空白或缓冲液来间隔每个样品的反应液。在管道式分析仪中,以空气分段系统式蕞多。(2)分立式分立式分析仪是按手工操作的方式编排程序,并以有节奏的机械操作代替手工,各环节用转送带连接起来,按顺序依次操作。各待测样本与试剂混合后的化学反应都是在各自的反应杯中完成。(3)离心式离心式分析仪指每个待测样本都是在离心力的作用下,在各自的反应槽内与试剂混合,完成化学反应并测定,由于混合,反应和检测几乎同时完成,它的分析效率较高。(4)干片式干片式分析仪指将试剂固相于胶片或滤纸片等载体上,每个待测样本滴加在相应试纸条上进行反应及测定。其优点是操作快捷、便于携带,目前多用于急诊和现场化验。(5)袋式袋式分析仪指是以试剂袋来代替反应杯和比色杯,每个待测样本在各自的试剂袋内反应并测定。苏州含光微纳科技有限公司的微流控产品经过精密加工,能够提供高质量的实验结果和可靠的性能。
分子诊断和免疫诊断、生化诊断设备不同的地方,很大程度在于样品前处理。免疫检测对象主要是一些游离的大分子,处理相对容易,但分子诊断样本处在细胞当中,处理过程容易被污染,因此前处理系统相对复杂。分子诊断系统的组成包括样本前处理系统、检测处理系统和分析处理系统。样本前处理系统依据其功能的丰富程度又包括移液操作和核酸提取两个平台,依据使用场所不同分为实验室自动化平台和现场前处理平台。目前前处理设备中,全自动的移液工作站是比较成功的设备。它是一种全自动、高精度移液系统,专门用于小体积的PCR、qPCR体系配置,能够完全替代手工,保证了配置实验扩增体系的正确性、精密度及重复性。缺点是功能单一,临床及科研应用尚有一定局限性。苏州含光微纳科技有限公司的微流控产品以其高质量和精密加工而闻名。广东流体驱动微流控产品技术
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四代测序,即纳米孔技术测序,目前已经成为资本市场追逐的热点,容量约为几十亿美元。原理很简单,就是DNA链打开后穿过一个很细的孔,单个碱基对通过纳米尺寸的通道时,会引起通道点穴性能的变化。四代测序具有高读长、易集成、小型化、高速度、大通量等优势。纳米孔所通电流很小,为10-18-10-15A,远低于荧光检测电流,所以目前检测时间大约需要几个小时到十几个小时,随着技术的不断进步,后期有望将测序时间缩短到半小时。纳米孔主要包括两大类生物纳米孔和固态纳米孔。生物大分子纳米孔发展较早,已经有了相应的设备,体积很小,准确率较低。固态纳米孔,目前还是实验室水平,有少数四代测序公司已经开始做固态纳米孔测序仪。固态纳米孔的检测方式很多,在基底上做一些材料掺杂,具有半导体特性,可替代光学器件,精确度也等性能指标更好。因为固态纳米孔使用的是标准的微电子工艺,如果可以规模化生产,可以降低测序仪生产成本,值得推广。湖南医用微流控产品厂家