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免疫沉淀基本参数
  • 品牌
  • 世途科生物
  • 产品名称
  • 免疫沉淀磁珠Protein A/G
  • 有效期
  • 12个月
免疫沉淀企业商机

染色质免疫共沉淀(Chromatinimmunoprecipitation,ChIP)技术是目前公认的研究此相互作用的选择,是真核生物基因表达机制研究中不可或缺的技术之一。
它的基本原理是在活细胞状态下,固定蛋白质-DNA(染色质)复合物,并将其切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法(抗体亲和)沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的 DNA,通过对目的片段的纯化与后期检测,从而获得蛋白质与 DNA 相互作用的信息。
这项技术通过蛋白质与DNA互作来分析目标基因活性以及已知蛋白质的靶基因,被广泛应用于体内转录调控因子与靶基因启动子上特异核苷酸序列结合方面的研究。该技术常与DNA芯片和分子克隆技术相结合。
免疫沉淀技术的实验设计。北京anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠价格

免疫共沉淀分析(Co-IP)与IP十分类似,基本的技术都是采用目标抗原特异性的固相化抗体;但IP的目标是纯化单一抗原,而Co-IP旨在分离抗原及与抗原结合的蛋白质或配体。

在Co-IP实验中,已知抗原称为诱饵蛋白,与之结合的蛋白则称为靶蛋白。靶蛋白可能是一些复杂的伴侣蛋白、信号分子、结构蛋白、辅助因子等,蛋白间相互作用强度范围可能介于高度瞬时和十分稳定之间。
基本的Co-IP实验方案与IP相同,实际上任何IP系统均可用于Co-IP。但是,还有许多其他因素需要考虑,例如,结合和洗涤条件的优化,优化时,需要考虑到诱饵蛋白-靶蛋白的相互作用强度以及抗体-诱饵蛋白的亲和力。
上海RIP免疫沉淀实验原理免疫沉淀技术RIP的实验设计。

Co-IP(免疫共沉淀)技术主要用于研究蛋白质之间的相互作用,其应用场景如下:
1. 蛋白质相互作用网络的鉴定:Co-IP可用于构建蛋白质相互作用网络,发现目标蛋白的结合伙伴。
2. 信号传导途径的研究:通过Co-IP技术,科学家们发现了许多关键的细胞信号通路,如MAPK和PI3K/Akt通路等,为深入理解这些通路的功能和调控机制提供了重要线索。
3. 药物靶点筛选:利用Co-IP技术,研究人员可以筛选潜在的药物靶点。
疾病机制研究:通过分析疾病相关蛋白质的相互作用,Co-IP有助于揭示疾病的分子机制。
4. 抗体药物开发:Co-IP可用于研究抗体药物与其靶标蛋白的结合特性,评估抗体药物的亲和力和特异性。
5. 转录因子研究:Co-IP技术可以用于研究转录因子与蛋白质的相互作用,进而揭示基因调控网络。

免疫沉淀纯化所得抗原量低有多种原因,
A. 纯化所得抗原量低
1. 抗原结合水平低
IP 应用中出现低抗原结合水平的可能原因有很多,结合反应所使用的溶液是重要原因之一。必须使用适合的缓冲液,有特定的pH和盐浓度,可能还需要添加互作所需的辅助因子。IP 或Co-IP 中用于纯化的抗体是影响得率的另一个重要因素。如果抗体本身易失活或与抗原结合微弱,则可能很难找到足够温和的条件,即能产生结合,又能保证在孵育和洗涤过程中结合可以稳定保持。
2. 抗原洗脱水平低
在某些情况下,抗原与抗体或结合蛋白结合之间可能会发生极强的相互作用,传统的洗脱缓冲液无法将其破坏。如果需要使用温和洗脱缓冲液收集功能性抗原,则上述矛盾尤为突出。

免疫沉淀技术的综述。

免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)是一种利用抗体与特定蛋白质结合的特性,从复杂样本中分离和纯化目标蛋白质的实验方法。这项技术在生物医学研究中有着广泛的应用场景,以下是一些主要的应用领域:
1. 蛋白质相互作用分析:通过免疫沉淀技术,研究人员可以研究蛋白质之间的相互作用,揭示蛋白质复合物的组成以及它们在细胞内的功能和调控机制。
2. 抗体药物开发:免疫沉淀技术可以用于研究抗体药物与其靶标蛋白的结合特性,评估抗体药物的亲和力和特异性,指导抗体药物的设计和优化。
3. 蛋白质表达水平分析:通过比较不同条件下的免疫沉淀结果,可以评估目标蛋白的相对量,进而研究蛋白质的表达调控。
4. 染色质免疫沉淀(ChIP):这是一种特殊的免疫沉淀技术,用于研究蛋白质与DNA的相互作用,如转录因子或组蛋白修饰与基因组特定区域的结合情况。
5. RNA免疫沉淀(RIP):类似于ChIP,RIP用于研究RNA结合蛋白与RNA分子之间的相互作用。
免疫沉淀技术的应用。苏州IP免疫沉淀磁珠的选择

免疫沉淀技术Co-IP实验步骤。北京anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠价格

免疫沉淀技术(Immunoprecipitation,简称IP)是一种生物学实验方法,用于从细胞或组织裂解物中分离和纯化特定蛋白质。这项技术依赖于抗体的高度特异性,通过抗体与目标蛋白质的结合,实现对目标蛋白质的富集和纯化。
具体操作步骤通常包括以下几个阶段:裂解细胞或组织,抗体与蛋白质结合,固相支持物的使用,免疫复合物的捕获,洗涤,洗脱分析。
免疫沉淀技术不仅可以用于检测蛋白质的存在和量,还可以用于研究蛋白质的翻译后修饰、蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质稳定性以及蛋白质的功能等。此外,免疫沉淀技术是许多其他高级实验技术的基础,如染色质免疫沉淀测序(ChIP-Seq)和蛋白质相互作用网络分析等。
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世途科生物简介:

上海世途科生物科技有限公司是一家集研发、生产、销售于一体的,为全球用户提供生物试剂的生命科学企业。世途科生物(CYTOCH)汇集了一支由海内外KOL组成的研发团队,他们在生物和化学领域拥有相当丰富的研发经验,通过将化学与生物技术相结合,致力于现有技术难点突破、新技术研究,为相关科学研究者提供思路和解决办法。

凭借着强大的研发实力和严谨的质量管理,通过产学研合作,加快客户科研成果的转化,不断推动行业的发展。

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