在动物疾病模型的构建过程中，为确保实验的准确性和可靠性，需要遵循以下几个方面：1.选择合适的动物模型：选择与人类疾病相似的动物模型，如小鼠、大鼠、猪等，以确保实验结果的可靠性。2.严格控制实验条件：包括动物的饲养、环境、饮食、免疫状态等，以减少实验误差。3.合理设计实验方案：包括实验组和对照组的设置、实验时间的选择、实验指标的确定等，以确保实验结果的可重复性。4.采用多种检测手段：包括生化指标、组织学检测、分子生物学检测等，以全方面评估实验结果的准确性。5.严格遵守伦理规范：包括动物实验伦理、实验安全等，以确保实验过程的合法性和安全性。总之，在动物疾病模型的构建过程中，需要严格遵守科学规范和伦理规范，以确保实验结果的准确性和可靠性。采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价。南京定制脑梗MCAO模型水迷宫
这种神经功能缺损评分是一种重要的实验方法，主要用于研究脑梗死后对动物神经功能的影响。在实验中，研究人员会观察动物的行为表现，例如运动协调能力、平衡能力、反应速度等，以评估神经功能缺损的程度。 首先，研究人员需要对实验动物进行脑梗死手术，以模拟人类脑梗死的病理过程。在手术后的一段时间内，研究人员需要密切观察动物的行为变化，并记录下来。例如，如果动物出现运动不协调、平衡能力下降、反应速度减慢等症状，研究人员就会记录下来。 然后，研究人员会根据观察到的行为变化，对动物的神经功能缺损程度进行评分。评分标准可以根据实验需求和具体情况制定，例如0分表示无缺损，1分表示轻度缺损，2分表示中度缺损，3分表示重度缺损等。南京定制脑梗MCAO模型水迷宫缺血性脑梗死具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点。
采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价，0分：无神经功能缺损症状；1分：出现左侧 Honer征，轻度神经功能缺损；2分：提尾对侧前肢内旋，肩内收，中度神经功能缺损；3分：向对侧转圈、向对侧倾倒，重度神经功能缺损；4分：不能自发行走，部分意识丧失。鼠侧倾倒，评分为3分。 沿脑桥上界面切断，去除嗅球，称全脑重，立即放入-20℃冰箱， 20 min 后取出，由前向后做连续冠状切片（切片厚度2 mm）。将脑切片置入0.1% TTC溶液中，后放入恒温振荡器中，37℃避光染色30 min，将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h，取出脑片，相机拍照，用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。
造模方法 颈部备皮常规消毒，取颈正中切口剪开皮肤，分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘； 游离出颈总动脉1.5cm，穿线备用； 向远心端找到颈外侧动脉，游离涌现结扎，提起颈总备用线，在近心端，远心端用动脉夹夹住； 在近心端动脉夹处，用5mL注射器针头刺破血管，稍微提起动脉夹，用镊子夹住线栓，从小口插入动脉后，去掉远心端动脉夹，然后用镊子夹住线栓，线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm； 用备用线将颈总和线栓一起结扎住，*好是结扎双道，记录线栓插入时间，在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住，去掉动脉夹； 注意缝合时不要将线栓带出，*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型，此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展，但模型制备的稳定性受很多因素的影响，如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据，对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。脑缺血是指由脑内血流量突然减少或代谢速率速增所致脑血流无法满足正常代谢需求的病理状态，可导致脑损伤。
局灶性缺血模型/线栓法引起的大脑中动脉栓塞（Middle Cerebral Artery Occlusion，MCAO）由于大（小）鼠脑血管解剖结构与人类相似，大脑中动脉也是临床缺血性卒中的高发部位，同时，采用线栓法也便于观察缺血和再灌注、永jiu（持续）和短暂性损伤等多种状态，在评价药物量效关系和确认治*时间窗等方面有一定优势，因此，MCAO是目前*广为接受一种药效模型。神经元尼氏体与细胞核呈蓝紫色，背景呈浅蓝色。结果显示：假手术组海马 CA1 区神经元排列规整，神经元胞体及树突内尼氏体丰富;实验组神经元排列紊乱，并伴有细胞水肿和坏死发生，尼氏体染色较浅，模糊不清;阳性*组神经元尼氏体排列较为规整，偶见神经细胞水肿，和溶解。麻醉时间，麻醉程度适中，过浅影响操作，过深导致死亡。南京定制脑梗MCAO模型水迷宫
进栓长度过长，易造成蛛网膜下腔出血，死亡率较高、模型制备失败。南京定制脑梗MCAO模型水迷宫
脑梗MCAO模型成功的评判方法 生物化学指标的检测：在实验过程中，检测血清中C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等生物化学指标的变化。这些指标可以反映炎症反应和缺血损伤的程度，有助于评估模型的成功。 病理学检查：实验结束后，对实验动物的大脑进行病理学检查。观察大脑皮质和海马区的细胞形态、排列情况，评估神经细胞的损伤程度。同时，通过免疫组化染色法检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达，以评估神经元损伤的程度。 行为学评估：在实验过程中，对实验动物进行行为学评估，如Morris水迷宫实验、步态分析等。通过比较不同处理组的行为学表现，评估模型的成功。 综上所述，评判脑梗MCAO模型成功的标准包括脑梗死面积、神经功能缺损评分、梗死血管、生物化学指标、病理学检查和行为学评估等方面。只有当这些指标均符合预期结果时，才能认为模型制备成功。南京定制脑梗MCAO模型水迷宫
