病毒全基因组测序基本参数
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病毒全基因组测序企业商机

病毒全基因组测序定中利用病毒传播过程中核酸序列上特定位置的变化来进行分型,着重于区分不同型别病毒的来源,是我国调整防控策略的重要依据之一。传统的病原微生物检测手段包括形态学检测、培养分离、生化检测和免疫学检测。这些方法检测周期长、灵敏度低,对操作人员的技术水平要求比较高等因素;荧光定量PCR技术和等温扩增技术等分子生物学的检测方法部分解决了上述问题,简单快速,通过对核酸特异性序列的检测,可在短时间内快速判断病原体的种类,但是这些方法无法进行混合传染鉴定和病毒溯源,随着基因组学技术的发展,高通量测序技术已经能够做到不依赖于传统的微生物培养,可直接对临床样本中的核酸进行高通量测序,然后与数据库进行比对,实现传染性疾病的溯源、检测、分型和耐药评估等多个方面,受到越来越多临床和科研工作者的关注。全国开设病毒相关测序的公司不超过5家。全基因组病毒二代测序分析技术

全基因组病毒二代测序分析技术,病毒全基因组测序

病毒全基因组测序定:探普生物对病毒的全基因组进行测序的实验基于二代测序技术。样本经过核酸纯化-文库构建-生物信息学分析这3大基本流程后转换成了序列数据。先,在核酸纯化环节,探普提供专门针对性的核酸纯化样本指南,以提高目的物种的核酸纯度和得率,与此同时探普生物也提供核酸纯化服务。第二,文库构建环节,样本的核酸具备浓度低,总量少的特点。探普生物专门针对这一点开发了超微量核酸文库构建,可以将0.01ng/μl甚至更低浓度的核酸构建成测序文库。第三,生物信息学分析环节。生存环境和状态决定了对病毒的全基因组进行测序的下机数据一般都伴随大量的宿主和其他微生物的数据。探普生物基于该特点,优化了自有数据库,搭载了专门用的的生物信息学分析流程,可处理复杂背景下的目标物种序列。


国内病毒二代测序进化分析技术病毒全基因测序技术对疾病的致病原进行全基因组测序研究,能发现其中的变异与遗传情况.

全基因组病毒二代测序分析技术,病毒全基因组测序

一直以来,病毒基因组测序都是疾病诊断、流行病学调查和宿主-病原关系研究的重要手段。病毒的全基因组测序以及对应的生物信息学分析方法是研究病毒进化、毒力因子变异、疫病爆发之间的关系、疫病传播途径、不同遗传变异的分布模式、疫病发生地理区域的基础。与传统Sanger测序相比,NGS技术的发展使得一个小的研究小组可以拥有大量病毒株的全基因组序列,测序成本也在逐步降低。由于NGS产生的数据量非常庞大,其序列拼接难度也随之增加。而且对于低浓度高复杂度的样本,研究者除了PCR外别无他法。而PCR方法往往具有偏好性,丢失的片段将为序列组装带来非常高的失败率。对于完全未知的样本,无法通过PCR进行富集,要鉴定其种类需要调用各种方法,逐个尝试工作量之大,其效率之低,使得一个新的研究方法的出现及其必要。


能实现对病毒的全基因组进行测序的技术手段:早期在高通量测序技术普及之前,对病毒的全基因组进行测序是通过非特异性扩增+克隆结合sanger测序来完成的。当物种有了参考的序列之后,可以通过特异性扩增+sanger测序获得全基因组序列。Sanger测序准确度高,读长很长,但与此同时,扩增和克隆工作费时费力,由于流程繁琐,加上快速变异导致引物无法通用,该方法对于大量基因组的测序工作而言,可操作性不强,这对于研究者一直是一个困扰。高通量测序技术正式启用之后,研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析,减少了工作量,增加了成功率。探普生物进行了大量有针对性的研发和测试,开发了全套的实验和分析流程用于对病毒的全基因组进行测序,该流程自运行以来广受研究者们好评。



病毒全基因测序不仅需要精密的仪器设备,也需要检测人员具有丰富的经验和过硬的技术。

全基因组病毒二代测序分析技术,病毒全基因组测序

目前对我国首例输入性裂谷热病例病毒进行全基因组测定,分析其进化来源及潜在变异.方法提取样本核酸,非特异性反转录扩增病毒基因组RNA,使用IonTorrent二代测序仪进行病毒全基因组测定.对获得的基因组数据进行序列拼接、比对、进化树构建和关键位点分析.结果通过测定获得了病毒全基因组11979nt,该测定病毒属E基因分支,序列与先前南非分离株Kakamas相似度较高(>98%)。病毒Gn蛋白C端信号肽区存在1个氨基酸突变.结论本研究分析测定的裂谷热病毒全基因组与目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出现明显变异。




对病毒全基因组进行测序,是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列。国内病毒二代测序进化分析技术

团队具备普通测序实验和分析基础。全基因组病毒二代测序分析技术

人类的病毒性传染很普遍,病毒可以通过呼吸道、消化道、皮肤等多种途径进行传播,常常会导致严重的公共健康问题,对人类的健康造成威胁。传统的病毒检测方法主要依赖于细胞培养法、抗原抗体结合法等,这些方法耗时久,灵敏度低,往往不能够满足临床检测需求。随着分子生物学的发展,PCR方法用于病毒检测的案例越来越多,但该方法的特异性限制了其同时检测其它病毒的能力。因此,需要通过新的技术来实现。随着二代测序技术成本的降低与普及,二代测序在临床病原体检测方面的优势也越加突显。该技术基于二代测序平台,可以直接从样本中获得病原体的核酸序列信息,再通过生物信息学的方法对得到的序列进行分析,可以快速地对样本中可能存在的全部病原体进行鉴定,缩短了临床检测的周期。全基因组病毒二代测序分析技术

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