材料:质粒DNA指数生长的真核细胞PEI(聚乙烯亚胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI储存液(100μM):称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm滤膜过滤,储存于4℃备用。1×HBS(pH7.4):将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水,加入20ml1M的HEPES,调pH值到7.4,定容至1L,过滤(0.2μm滤膜)后储存于4℃备用。方法:1.细胞分盘:通过胰酶消化收集细胞,用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上(根据实验需要选择培养皿,使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90%)。根据细胞贴壁情况于含5%CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。
PEI转染对复合物孵化的时间是有要求的,一般建议5-20分钟之间。国产PEI转染试剂中国代理权
细胞转染实验是生物医学实验室中常规的研究手段,目的是把外源基因、蛋白或者小分子导入到靶细胞内。目前主要有三种主流方法:生物转染,物理转染和化学转染。其中生物转染主要是利用病毒等微生物作为基因导入载体,以慢病毒、腺病毒和腺相关病毒等常见,其侵染效率可以达到90%以上,但常因安全性等问题,很多实验室对其敬而远之。物理转染主要包括显微注射、电穿孔和基因,无论哪一种都需要特定的设备,且一分钱一分货,性能好的价格也都很性感。上海曼博生物是Polysciences官方授权du jia代理商,更多关于转染试剂相关问题,欢迎咨询上海曼博生物!无动物源成分PEI转染试剂好用么PEI转染试剂的残留检测方法怎么开发?
上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务,以创新和为价值理念,通过自身研发团队,以及与国内外专业科研团队强强联合,不断创新,为生命科学和医药研发行业提供产品和服务。生物医学工程是综合应用生命科学与工程科学的原理和方法,从工程学角度在分子、细胞、组织、乃至整个人体系统多层次认识人体的结构、功能和其他生命现象,研究用于防病、治病、人体功能辅助及卫生保健的人工材料、制品、装置和系统技术的总称。
化学转染方法是生物医学研究中常用的转染方法,主要包括两类:阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。一方面使复合体整体带上正电荷(多数细胞膜表面带有弱的负电荷,通过电荷作用吸引复合体到细胞膜表面);另一方面对线性的核酸进行浓缩,使其体积变小更易穿透细胞膜。阳离子聚合物类转染试剂可以说是贫穷实验室的福音了。早在2012年就有研究小组在大名鼎鼎的Nature Protocol上发表了PEI作为转染试剂的详细方法,到现在被越来越多的实验室采用。Polysciences 是一家化学品制造公司,产品广泛应用于各个科研领域。公司成立于1961年,起初为电子显微镜提供纳米级样本制备方案,帮助科学家揭示未知领域。随后,开拓了在病理(组织研究)应用产品,使组织除了石蜡包埋外,还能够包埋在塑料块中;开发染料和染色剂,以实现更好的样品观测方式。上海曼博生物是Polysciences官方授权du jia代理商,更多关于转染试剂相关问题,欢迎咨询上海曼博生物!哪个品牌的PEI转染试剂性价比高?
对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板,可适当降低铺板密度,以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞,可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情况下,DNA-PEI复合物仍能转染细胞,但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。
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抗体药物研发客户提供小众创新产品,包括从Researchgrade到cGMP等级的无动物源培养基质,转染试剂、病毒转导试剂、基因编辑工具等产品和定制服务,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)药物研发从R&D到Clinicaltrial以及后期商业化的无缝转化;以及提供药物开发和探索的抗体文库定制和商业授权灵活的CHO工程细胞株以支持抗体药物的商业化生产,以此希望帮助国内科研工作者快速地接触世界范围内的技术,分享研发工具进步带来的技术红利,终为细胞、基因产业以及再生医学行业等乃至整个生命科学行业赋能!国产PEI转染试剂中国代理权
上海曼博生物医药科技有限公司位于自由贸易试验区达尔文路16幢104室。公司业务涵盖血小板裂解液,WB自动孵育系统,微流控器官芯片,蓝牙无线标签机等,价格合理,品质有保证。公司将不断增强企业重点竞争力,努力学习行业知识,遵守行业规范,植根于医药健康行业的发展。曼博生物秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念,全力打造公司的重点竞争力。
PEI在于可以应用于体内试验。当初试验经费很有限,被逼无奈只能放弃脂质体2000,选择PEI,以至于...
【详情】PEI在于可以应用于体内试验。当初试验经费很有限,被逼无奈只能放弃脂质体2000,选择PEI,以至于...
【详情】注意事项质粒质量:请务必使用高质量转染级无内质粒(推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒...
【详情】对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前两天铺板可显...
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【详情】特别提醒1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞,在转染前...
【详情】Polysciences 转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)的...
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【详情】产品特点:PEIMAX40K是线性聚乙烯亚胺盐酸盐形式(LinearPolyethylenimine...
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