HE染色注意事项:1.组织切片的脱蜡步骤应彻底,否则无论进行那种染色都会发生困难。脱蜡时间要充分,若溶蜡剂使用过久应及时更换以免效率降低,若室温过低,可将溶蜡剂置于温箱中进行脱蜡。 2.苏木素染液使用一段时间后表面易出现亮晶状飘浮物,这可能是液体表面的过氧化物,必须过滤除去,以防沉渣污染组织切片。苏木素液一般染过三、四百张切片后,着色力会减弱,着色不鲜艳,呈灰蓝色时应及时更换新液。 3.染色的时间长短需依据:染剂对组织的染色作用,室温条件,切片厚薄,固定液的类别,染液的新旧而进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。 4.分化十分重要。分化步骤的准确也是染色成败的关键,若分化失当则必然引起染色不匀或过淡,过深等现象,因此分化后一定要镜检,观察胞核是否清晰,胞浆呈淡白色。否则需再次分化,不然一旦复染后,组织会呈紫蓝色即“蓝盖红”现象。 5.还原液不宜过浓,若碱性太强易使组织脱落故以淡为宜。 6.伊红宜淡染,复染过深胞核会不清晰,影响镜检。 心脏组织HE染色如何观察。西藏值得信赖的HE染色哪家好
HE染色:在组织病理学中,苏木素-伊红染色是一种日常使用比较普遍的常规染色方法。常规苏木素染色的对比染色是用伊红,也有采用焰红,因为焰红比伊红色泽更鲜明,还有采用橘黄G,比布里希猩红,波尔多红等作为对比染色。伊红是比较常用的胞质染料,本身溶于醇而不溶于水,为砖红色粉末状或酱红色结晶。配方:伊红Y(水溶)0.5-1g,蒸馏水99ml。如果取用伊红Y(醇溶性)应当溶于99ml 75%或95%的乙醇中。如果在伊红液中加入0.5ml冰醋酸,可以加速其染色过程,使得胞质的色泽更加艳丽。结果是细胞核呈蓝色,胞质、肌肉、结缔组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同程度的红色。钙盐和各种微生物也可染成蓝色或紫蓝色。河南靠谱的HE染色报告HE染色是病理实验中比较用的一种基础染色方法。
HE染色常见问题:成片的染色模糊不清,灰染答:(1)组织未及时固定,部分自溶;或固定不佳,深部组织未处理到。这种只能重新固定了。(2)尽管乙醇也是一种固定液,但尽量少用或不用,因为其会导致组织发硬变脆,染色效果不好。(3)包埋时蜡的温度过高,或切片后烤片时间和温度过久过高都不好,可能会导致无法染色。(4)脱蜡不彻底;染料有问题;分化过度导致的颜色变淡,镜下组织界限不清;染完后的脱水和透明不佳,水雾残留在组织上。(5)通风窗中(防止空气中的水雾),戴口罩操作封片(减少哈气带来的水雾)。
HE染色等常规染色,组化或是荧光优先推荐做石蜡切片。原因:石蜡切片对组织的形态保存比冰冻切片好,并且对抗原基本无影响。脂质染色(油红O染**odipy染色,尼罗红染色)必须做冰冻切片,不能做石蜡切片。以下染色必须要新鲜或冷冻组织冰冻切片:ROS染**-半乳糖甘酶染色,ATP染色,胆固醇染色。如果标本已经放在-80°冰箱冷冻了之后又想要做石蜡切片,将标本取出来千万不要解冻直接放于固定液内固定(在固定液内边解冻边固定)。组织形态结构保存完好顺序:新鲜组织立即投入固定液内固定石蜡切片>组织-80°冷冻后投入固定液内固定石蜡切片>新鲜组织立即投入固定液内固定冰冻切片>组织-80°冷冻后直接冰冻切片。HE染色注意事项以及常规的流程解析。
HE染色法,。苏木精染液为碱 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。而线粒体用HE染色不可见,活细胞通常要求活细胞近似无色线粒体需要用健那绿来染色,再在高倍镜下观察。从人或动物新鲜尸体上取下块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林,Bouin氏固定液等)使、细胞的蛋白质变凝固,以防止细胞后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去块中的水份。再将块置于既溶于酒精,又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出块的中酒精,才能浸蜡包埋。HE染色需要哪些材料及实验步骤。湖南比较好的HE染色服务
HE染色规范化流程以及注意事项。西藏值得信赖的HE染色哪家好
HE染色反蓝的原理:苏木素染液,细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸(DNA),DNA的双螺旋结构中,两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。 分化:苏木素染色之后,用水洗去未结合在细胞上的染液,但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去,才能保证细胞核和细胞浆染色的分明,把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构,使色素与组织解离,分化不可过度。蓝化:分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,在碱性条件下处于蓝色离子状态,而呈蓝色,所以分化之后用水洗去酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色,称蓝化作用,一般多用自来水浸洗即可变蓝,也可用温水(50度温水比较好)变蓝。西藏值得信赖的HE染色哪家好
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