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试剂基本参数
  • 品牌
  • 上海楚知生物
  • 生产企业
  • 常州天地人和
  • 产地
  • 江苏常州
  • 厂家
  • 常州天地人和
试剂企业商机

蛋白纯化试剂NiSmartBeads是一种新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Ni离子,具体性能见表1。NiSmartBeads主要应用于分泌到真核培养液上清中的组氨酸标记蛋白的捕获和纯化,可以在含有EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白高效的纯化。NiSmartBeads有很强的组分兼容性,适用于***底物及盐浓度的缓冲条件2.纯化流程2.1缓冲液的准备可使用下列推荐缓冲液,也可根据自己的使用习惯配置不同的缓冲液体系,基本原理就是低咪唑上样,高咪唑洗脱,或者高pH上样,低pH洗脱。缓冲液在使用前比较好用0.22μm或者0.45μm滤膜过滤除菌。带负电荷的强阴离子交换介质。安徽多肽试剂代理厂家

蛋白纯化试剂.产品介绍,DextrinBeads是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白(MBP)标签蛋白的亲和层析介质,具体性能见表1。MBP可促进连接蛋白的正确折叠,增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。DextrinBeads可以一步纯化MBP融合蛋白,结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱,保护了标签蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位点特异性蛋白酶切除。问题及解决方案问题原因分析:柱子反压过高填料被堵塞按照第3部分进行树脂清洗。裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上柱前使用滤膜(0.22或0.45μm)过滤,或者离心去除。目的蛋白没有吸附目的蛋白未表达确保目的蛋白表达样品或缓冲液中存在一些干扰因素如非离子去污剂样品透析或用结合液稀释细胞产生大量的淀粉酶影响结合力培养基中添加葡萄糖,抑制淀粉酶的表达融合蛋白使麦芽糖结合位点阻塞或扭曲,影响了目的蛋白的结合力更换载体柱子结合时间太短将样品与DextrinBeads振荡孵育4度2小时或更长时间洗脱样品较杂目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制剂,如PMSF、EDTA等平衡/洗杂不充分增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂,如树脂太脏按照第3部分进行树脂清洗浙江天地人和试剂纯化流程琼脂糖微球的试剂哪家好?

上海楚知生物试剂分享篇:蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,必要时可加入相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),防止目的蛋白被降解。精细纯化阶段则需要更高的分辨率,此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质接近的蛋白区分开来,要用更小的树脂颗粒以提高分辨率,常用离子交换柱和疏水柱,应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素。选择性指树脂与目的蛋白结合的特异性,柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上集中洗脱的能力,洗脱峰越窄,柱效越好。*有好的选择性,洗脱峰太宽,蛋白照样不能有效分离。

上海楚知生物蛋白纯化试剂产品介绍:c-Myc蛋白含有bHLH结构域,该蛋白在正常机体发育和**发生过程中起着非常重要的作用,c-Myc是一个重要的转录因子,其异常表达能促进多种**的的发生和发展。将人p62c-Myc蛋白的410-419这段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的N端或者是C端,可以对目的蛋白进行准确的检测、定位和纯化。抗体来源:小鼠交叉反应:c-Myc标签融合蛋白克隆类型:单克隆抗体亚型:IgG2A来源:293细胞表达的重组抗体纯化方式:rProteinA亲和纯化产品纯度:≥95%,SDS-PAGE检测储存缓冲液:1×PBS(pH7.4),0.02%叠氮钠,50%甘油储存条件:干冰运输,-20℃可保存一年,避免反复冻融标签融合蛋白纯化试剂盒。

磁珠法口腔拭子基因组提取试剂盒可以快速地从口腔拭子中提取高质量DNA。提取出的基因组 DNA A260/A280 典型的比值达 1.7-1.9,产物可用于PCR、载体构建、核酸杂交等下游实验。 

磁珠法口腔拭子基因组提取试剂盒组成

试剂名称      50T      200T

Buffer A        5ml     20ml

Buffer B        10ml    40ml

蛋白酶K        500μl     2ml

磁珠              10ml      40ml

Wash Buffer  125ml     100ml

Elution Buffer  5ml        20m

l2.问题及解决方案

提不到DNA或产量很低取样量少:取样前半小时漱口。样品保存不当:确保样品新鲜有效。可能没加入ProteinaseK,或加入量不足,导致细胞裂解不完全,或者65℃孵育时间过短。   2.DNA未完全回收:减少上样量或增加磁珠量,确保样品充分吸附。确保磁珠与样品充分混匀,吸附时磁珠一直保持悬浮状态。3洗脱液中无/很少DNA:确保Washbuffer中加入相应的乙醇,用完后要密封保存,防止挥发。确保洗脱液中的盐浓度和pH。洗脱液用量不当:调整洗脱液体积。磁珠风干时间太长,磁珠未完全分散。4,DNA纯度不高,有污染RNA污染:检查RNase是否有问题,适当增加RNase的用量。洗杂不充分,含有杂质。若用去离子水洗脱DNA,A260/280比值会偏低,但并不表示纯度低。 一步纯化或者去除纤维结合蛋白。浙江多肽试剂销售价格

带正电荷的强阳离子交换介质。安徽多肽试剂代理厂家

金属螯合亲合层析,是一种新型的应用于原**白纯化的技术。该方法通过蛋白质表面的一些特殊的氨基酸,使之与金属离子发生相互作用,从而对蛋白质进行亲和纯化。这些作用包括配价键结合、静电吸附、共价键结合等,其中以6个组氨酸残基组合的融合标签(His-Tag)在原**白表达中的应用**为***。His-Tag可结合在目的蛋白的C末端或N末端,形成特殊的结构,以便于进行下一步的纯化及检测。由于金属螯合亲合层析具有配体简单、吸附量大、分离条件温和、通用性强等特点,所以可选择范围广,高盐,存在变性剂以及去垢剂的上样条件下进行纯化,His-Tag正逐渐成为分离纯化蛋白质等生物工程产品***的技术之一。选试剂到楚知安徽多肽试剂代理厂家

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