金属螯合亲合层析,是一种新型的应用于原**白纯化的技术。该方法通过蛋白质表面的一些特殊的氨基酸,使之与金属离子发生相互作用,从而对蛋白质进行亲和纯化。这些作用包括配价键结合、静电吸附、共价键结合等,其中以6个组氨酸残基组合的融合标签(His-Tag)在原**白表达中的应用**为***。His-Tag可结合在目的蛋白的C末端或N末端,形成特殊的结构,以便于进行下一步的纯化及检测。由于金属螯合亲合层析具有配体简单、吸附量大、分离条件温和、通用性强等特点,所以可选择范围广,高盐,存在变性剂以及去垢剂的上样条件下进行纯化,His-Tag正逐渐成为分离纯化蛋白质等生物工程产品***的技术之一。选试剂到楚知纯化过程中如何洗脱?河南蛋白纯化试剂销售价格
蛋白纯化试剂产品介绍:HA标签是人流感血凝素的第98-106氨基酸序列YPYDVPDYA,对外源靶蛋白的空间结构影响小,容易构建成标签蛋白融合到蛋白N端或者C端,因此常被用于重组蛋白的融合表达。Anti-HAAntibody能够特异性识别HA标签,从而用于融合蛋白的表达和定位检测。抗体来源:小鼠交叉反应:HA标签融合蛋白克隆类型:单克隆抗体亚型:IgG2A来源:293细胞表达的重组抗体纯化方式:rProteinA亲和纯化产品纯度:≥95%,SDS-PAGE检测储存缓冲液:1×PBS(pH7.4),0.02%叠氮钠,50%甘油储存条件:干冰运输,-20℃可保存一年,避免反复冻融-上海楚知生物福建分子生物酶试剂代理厂家一步纯化或者去除纤维结合蛋白。
蛋白质纯化注意事项:在进行任何一种蛋白质纯化的时候,都要时刻注意维护它的稳定性,保护它的活性,有一些通用的注意事项需要牢记,它们包括:1、操作尽可能置于冰上或者在冷库内进行。2、不要太稀,蛋白浓度维持在μg/mL~mg/mL。3、合适的pH,除非是进行聚焦层析,所使用的缓冲溶液pH避免与pI相同,防止蛋白质的沉淀。4、使用蛋白酶抑制剂,防止蛋白酶对目标蛋白的降解;在纯化细胞中的蛋白质时,加入DNA酶,降解DNA,防止DNA对蛋白的污染。5、避免样品反复冻融和剧烈搅动,以防蛋白质的变性。6、缓冲溶液成分尽量模拟细胞内环境。7、在缓冲溶液中加入0.1~1mmol/LDTT(二硫苏糖醇)(或β-巯基乙醇),防止蛋白质的氧化。8、加1~10mmol/LEDTA金属螯合剂,防止重金属对目标蛋白的破坏。9、使用灭菌溶液,防止微生物生长。 ;选试剂上海楚知生物
常州天地人和纯化试剂CoSmartBeads6FF产品介绍,CoSmartBeads6FF是一种新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Co离子,具体性能见表1。Co2+离子半径大于Ni2+,因此Co2+结合His标签能力小于Ni2+。CoSmartBeads6FF主要应用于分泌到真核培养液上清中的组氨酸标记蛋白的捕获和纯化,可以在含有EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白高效的纯化。CoSmartBeads6FF有很强的组分兼容性,适用于***底物及盐浓度的缓冲条件,本信息由上海楚知生物科技有限公司提供更高的抗体结合能力。
生物试剂试剂的取用规则 , 固体粉末试剂可用洁净的牛角勺取用。要取一定量的固体时,可把固体放在纸上或表面皿上在台秤上称量。要准确称量时,则用称量瓶在天平上进行称量。液体试剂常用量筒量取,量筒的容量为:5mL、10mL、50mL、500mL等数种,使用时要把量取的液体注入量筒中,使视线与量筒内液体凹面的比较低处保持水平,然后读出量筒上的刻度,即得液体的体积。 如需少量液体试剂则可用滴管取用,取用时应注意不要将滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。 为了达到准确的实验结果,取用试剂时应遵守以下规则,以保证试剂不受污染和不变质: (1)试剂不能与手接触。 (2)要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,***不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,方可取用另一种试剂。 (3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后将瓶放回原处。 (4)已取出的试不能再放回原试剂瓶内。 另外取用试剂时应本着节约精神,尽可能少用,这样既便于操作和仔细观察现象,又能得到较好的实验结果.中压预装柱HiPur系列HiSelect Ni 6FF。河南蛋白纯化试剂销售价格
常见的蛋白质分离纯化方法。河南蛋白纯化试剂销售价格
蛋白纯化试剂,上海楚知生物代理天地人和,1.产品介绍NiIDABeads可以用于各种表达来源(如大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞)的组氨酸标签(6xHis-tagged)蛋白的纯化。它是以4%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联了三配位的亚氨基二乙酸(IDA),螯合镍离子(Ni2+)后,可以形成比较稳定的平面四边形结构,从而有更多的位点与组氨酸标签上的咪唑环继续配位,达到结合目的蛋白的效果(产品化学结构见图1所示)。但是,这样的结构比较容易受到其他小分子的进攻,镍离子易被还原或者被螯合,从而破坏其化学结构,无法结合目的蛋白。NiIDABeads具有载量高,性价比高的优点河南蛋白纯化试剂销售价格
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