rProteinA/GBeads4FF是将rProteinA/G高密度定向偶联到高度交联的琼脂糖凝胶微球表面,该产品具有更高的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率,洗脱条件更均一,一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于90%的抗体。产品性能见表1。本产品主要用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究,也可用于抗体固定及其它相关研究。用户可根据目标抗体的种属来源及亚型选择微球的类别,纯化流程本产品主要应用于免疫沉淀(IP)以及免疫共沉淀(Co-IP)研究。2.1缓冲液的准备所用水和缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm滤膜过滤。平衡/洗杂液:0.15MNaCl,20mMNa2HPO4,pH7.0洗脱液:0.1M甘氨酸,pH3.0中和液:1MTris-HCl,pH8.5交联液:0.2M三乙醇胺,pH8.2交联剂:DMP(dimetylpimelimidatedihydrochloride)终止液:50mMTris,pH7.5核酸提取或纯化试剂。湖北蛋白检测试剂哪种品牌好
常州天地人和纯化试剂CoSmartBeads6FF产品介绍,CoSmartBeads6FF是一种新型IMAC填料,螯合有非常牢固的Co离子,具体性能见表1。Co2+离子半径大于Ni2+,因此Co2+结合His标签能力小于Ni2+。CoSmartBeads6FF主要应用于分泌到真核培养液上清中的组氨酸标记蛋白的捕获和纯化,可以在含有EDTA及DTT的情况下进行目的蛋白高效的纯化。CoSmartBeads6FF有很强的组分兼容性,适用于***底物及盐浓度的缓冲条件,本信息由上海楚知生物科技有限公司提供安徽离子交换试剂哪里买核酸提取系列DNA Fragselect XP Magnetic Beads。
蛋白纯化试剂抗体纯化rProtein A/G Beads 4FF纯化流程,样品准备上柱之前要确保样品溶液有合适的离子强度和pH值,可以用平衡/洗杂液对血清样品、腹水或细胞培养液稀释,或者样品用平衡/洗杂液透析。对于100mm培养皿中的贴壁细胞,吸除细胞培养液,使用预冷PBS洗涤一次后加入2ml细胞裂解液裂解细胞。对于悬浮细胞,离心收集细胞后,PBS洗涤一次后参考贴壁细胞的裂解方法进行裂解。植物或动物组织样品可以使用液氮研磨方法裂解。具体的裂解方法请参考不同裂解液的使用说明,裂解液**终总蛋白浓度选择在0.5-1μg/μl范围内较为合适。通常针对目标蛋白的表达量不同,需要对总蛋白浓度进行预实验调整。2.3.去除非特异性结合(可省略)1)取200微升至1毫升蛋白样品,加入约1微克和免疫沉淀时使用的IgG种属相同的3/5常州天地人和生物科技有限公司NormalIgG和20微升充分重悬的rProteinA/GBeads4FF,4℃缓慢摇动30分钟。2)2500rpm(约1000g)离心1分钟,取上清用于后续的免疫沉淀。注:哺乳动物细胞内有多种成分可以和IgG发生结合,可能会在后续免疫印迹中出现非特异性条带。使用normalIgG和rProteinA/GBeads4FF对裂解液预处理可以降低非特异性吸附。
蛋白纯化试剂常州天地人和Strep-tag标记技术可用于从各种表达系统中纯化功能性链球菌标记蛋白,包括杆状病毒、哺乳动物细胞、酵母和细菌。该技术可耐受不同的缓冲条件和添加剂(高盐、洗涤剂、还原剂、金属离子和螯合剂),普遍适用于大部分蛋白质性质,而且方便于蛋白质和蛋白质质检相互作用分析。一般来说,上述两种标签都不干扰目标蛋白的折叠或生物活性,不与重金属离子反应,不具有离子交换特性,也不会引起蛋白质聚集。因此,纯化后无需去除Strep-tagII和TwinStrep-tagII。此外,TwinStrep-tagII/STarmSterptaction组合适用于固定化和检测分析应用,如ELISA或SPR。这种多功能性使得Strep-tag标记技术优于其他可用的基于标记的亲和纯化系统。STarmStreptactinBeads4FF的配体蛋白是Streptactin的突变体,其偶联至高度交联的4%琼脂糖微球上。样品中低浓度(50umol/L)的D-生物素不会影响目的蛋白和STarmStreptactinBeads4FF的结合效果。该产品在使用后可用平衡液再生,或者使用10mMNaOH进行一定程度的清洗。谷胱甘肽亲和纯化介质。
上海楚知生物试剂分享篇:蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异,利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染,而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异,利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开,由于此时样本体积大、成分杂,要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽.并可以迅速将蛋白与污染物分开,必要时可加入相应的保护剂(例如蛋白酶抑制剂),防止目的蛋白被降解。精细纯化阶段则需要更高的分辨率,此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质接近的蛋白区分开来,要用更小的树脂颗粒以提高分辨率,常用离子交换柱和疏水柱,应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素。选择性指树脂与目的蛋白结合的特异性,柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上集中洗脱的能力,洗脱峰越窄,柱效越好。*有好的选择性,洗脱峰太宽,蛋白照样不能有效分离。带正电荷的强阳离子交换介质。河南蛋白检测试剂哪种品牌好
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Ni NTA Beads是以4%琼脂糖凝胶为基质,通过化学方法偶联了四配位的氮川三乙酸(NTA),螯合镍离子(Ni2+)后,可以形成非常稳定的八面体结构,镍离子处于八面体的中心,这样的结构很有效的保护了镍离子免受小分子的进攻(产品结构见图1所示,三种产品结构的区别),更加稳定,具体性能见表1。Ni NTA Beads可以耐受一定浓度的还原剂、变性剂或耦合剂等苛刻条件(见表2),适用性更广,配体更稳定,选择性更高。 选蛋白纯化试剂iu选上海楚知-天地人和湖北蛋白检测试剂哪种品牌好
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