抗体纯化磁珠 1.抗体纯化磁珠试剂盒是否可以重复使用？ 答：不推荐重复使用，不同样本之间容易造成污染。 2.若体系中含有木瓜蛋白酶，是否影响磁珠的使用？ 答：木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，目前对protein A的影响未知，建议客户慎用。 3.1mL抗体纯化磁珠能够用多少次? 答：1mL磁珠能够结合1.5-2.0mg抗体，客户需要根据结合抗体的量来确定使用磁珠的量。 4.试剂盒中的缓冲液用完后，能否告知配方？ 答：试剂盒中缓冲液的成分都是保密的。可以采用以下的缓冲液进行替代。 结合缓冲液:PBST 150mM PBS，150mM NaCl，0.1% (v/v) Tween-20，pH7.2 洗脱缓冲液:甘氨酸缓冲液 0.1M Glycine，0.1% (v/v) Tween-20，pH2.5（该缓冲液适合于耐酸性的抗体）。 0.1M Glycine，3M MgCl2 (4M protein A/G) ，0.1% (v/v) Tween-20，pH4.5（该溶液含较高浓度的盐，不可直接进行SDS-PAGE。可以用透析或超滤的方法去除过多的盐）。 保存缓冲液： 50mM Tris-HCl，0.1%(v/v) Tween-20，0.01%(w/v) NaN3，pH7.5 洗涤缓冲液： 50mM Tris-HCl，0.1%(v/v) Tween-20，pH7.5） 再生缓冲液： 1% (v/v) TritonX-100 常规阳离子交换介质推荐 SP Beads 6FF。上海核酸提取试剂生产商
蛋白质纯化注意事项：在进行任何一种蛋白质纯化的时候，都要时刻注意维护它的稳定性，保护它的活性，有一些通用的注意事项需要牢记，它们包括：1、操作尽可能置于冰上或者在冷库内进行。2、不要太稀，蛋白浓度维持在μg/mL～mg/mL。3、合适的pH，除非是进行聚焦层析，所使用的缓冲溶液pH避免与pI相同，防止蛋白质的沉淀。4、使用蛋白酶抑制剂，防止蛋白酶对目标蛋白的降解；在纯化细胞中的蛋白质时，加入DNA酶，降解DNA，防止DNA对蛋白的污染。5、避免样品反复冻融和剧烈搅动，以防蛋白质的变性。6、缓冲溶液成分尽量模拟细胞内环境。7、在缓冲溶液中加入0.1~1mmol/LDTT（二硫苏糖醇）(或β-巯基乙醇），防止蛋白质的氧化。8、加1~10mmol/LEDTA金属螯合剂，防止重金属对目标蛋白的破坏。9、使用灭菌溶液，防止微生物生长。 ；选试剂上海楚知生物江西抗体纯化试剂纯化流程抗体亲和纯化产品分为通用性抗体，单克隆抗体，多克隆抗体。
上海楚知生物蛋白纯化试剂：蛋白纯化方法有几种？根据蛋白的特性，一般可以有以下5种纯化方法：1。凝胶过滤层析。根据大小和形状分离，这种分离方式是非吸附性的，整个分离过程中只需要一种缓冲液，实验操作方便。在峰谱图中，出峰顺序是：大分子先流出层析柱，小分子后出。2。离子交换层析。不同蛋白质的等电点（pI，isoelectricpoint）特性，使在不同pH缓冲液条件下所带正/负净电荷不同，选择不同的离子交换柱实现分离。离子交换层析属于吸附性分离方式，纯化过程中它具有可逆、操控性强及实现样品浓缩等特点。在精纯实验中是常与其它方法相结合使用的主要技术。3。亲和层析。通过生物分子之间的特异性相互作用来实现分离的层析方法。亲和层析具有高选择性、高纯度、快速、浓缩等特点，在重组蛋白的分离中多作为第一步的粗纯，实现对绝大部分杂质蛋白的去除
蛋白纯化试剂，抗体纯化产品rProteinABeads是用于分离和纯化单克隆抗体、多克隆抗体或Fc-融合蛋白的通用性亲和层析介质，具体性能见表1。ProteinA是一种分离自金黄色葡萄球菌的细胞壁蛋白，主要通过Fc片段结合哺乳动物IgG，但是不与狗lgG结合，不结合人lgM、lgD和IgA。蛋白A与蛋白G与不同来源及亚类的免疫球蛋白结合能力不一样，具体见表2。天然ProteinA有五个IgG结合区域和一些未知功能的区域，重组proteinA去除了与白蛋白及细胞表面结合位点，只含有五个IgG结合区域，减少了非特异性吸附。带正电荷的强阳离子交换介质。
上海楚知生物试剂分享篇：蛋白纯化要利用不同蛋白间内在的相似性与差异，利用各种蛋白间的相似性来除去非蛋白物质的污染，而利用各蛋白质的差异将目的蛋白从其他蛋白中纯化出来。每种蛋白间的大小、形状、电荷、疏水性、溶解度和生物学活性都会有差异，利用这些差异可将蛋白从混合物如大肠杆菌裂解物中提取出来得到重组蛋白。蛋白的纯化大致分为粗分离阶段和精细纯化阶段二个阶段。一般蛋白纯化采用的方法为树脂法。粗分离阶段主要将目的蛋白和其他细胞成分如DNA、RNA等分开，由于此时样本体积大、成分杂，要求所用的树脂高容量、高流速、颗粒大、粒径分布宽．并可以迅速将蛋白与污染物分开，必要时可加入相应的保护剂（例如蛋白酶抑制剂），防止目的蛋白被降解。精细纯化阶段则需要更高的分辨率，此阶段是要把目的蛋白与那些分子量大小及理化性质接近的蛋白区分开来，要用更小的树脂颗粒以提高分辨率，常用离子交换柱和疏水柱，应用时要综合考虑树脂的选择性和柱效两个因素。选择性指树脂与目的蛋白结合的特异性，柱效则是指各蛋白成分逐个从树脂上集中洗脱的能力，洗脱峰越窄，柱效越好。*有好的选择性，洗脱峰太宽，蛋白照样不能有效分离。6X组氨酸标记（His-tag）蛋白纯化试剂说明。湖南磁珠系列试剂哪里买
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上海楚知生物蛋白纯化试剂产品介绍：c-Myc蛋白含有bHLH结构域，该蛋白在正常机体发育和**发生过程中起着非常重要的作用，c-Myc是一个重要的转录因子，其异常表达能促进多种**的的发生和发展。将人p62c-Myc蛋白的410-419这段氨基酸序列（EQKLISEEDL）融合至目的蛋白的N端或者是C端，可以对目的蛋白进行准确的检测、定位和纯化。抗体来源：小鼠交叉反应：c-Myc标签融合蛋白克隆类型：单克隆抗体亚型：IgG2A来源：293细胞表达的重组抗体纯化方式：rProteinA亲和纯化产品纯度：≥95%，SDS-PAGE检测储存缓冲液：1×PBS(pH7.4)，0.02%叠氮钠，50%甘油储存条件：干冰运输，-20℃可保存一年，避免反复冻融上海核酸提取试剂生产商
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