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试剂基本参数
  • 品牌
  • 上海楚知生物
  • 生产企业
  • 常州天地人和
  • 产地
  • 江苏常州
  • 厂家
  • 常州天地人和
试剂企业商机

上海楚知生物蛋白纯化试剂产品介绍:c-Myc蛋白含有bHLH结构域,该蛋白在正常机体发育和**发生过程中起着非常重要的作用,c-Myc是一个重要的转录因子,其异常表达能促进多种**的的发生和发展。将人p62c-Myc蛋白的410-419这段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的N端或者是C端,可以对目的蛋白进行准确的检测、定位和纯化。抗体来源:小鼠交叉反应:c-Myc标签融合蛋白克隆类型:单克隆抗体亚型:IgG2A来源:293细胞表达的重组抗体纯化方式:rProteinA亲和纯化产品纯度:≥95%,SDS-PAGE检测储存缓冲液:1×PBS(pH7.4),0.02%叠氮钠,50%甘油储存条件:干冰运输,-20℃可保存一年,避免反复冻融核酸提取系列DNA Fragselect XP Magnetic Beads。上海定制试剂哪里买

磁珠法口腔拭子基因组提取试剂盒可以快速地从口腔拭子中提取高质量DNA。提取出的基因组 DNA A260/A280 典型的比值达 1.7-1.9,产物可用于PCR、载体构建、核酸杂交等下游实验。 

磁珠法口腔拭子基因组提取试剂盒组成

试剂名称      50T      200T

Buffer A        5ml     20ml

Buffer B        10ml    40ml

蛋白酶K        500μl     2ml

磁珠              10ml      40ml

Wash Buffer  125ml     100ml

Elution Buffer  5ml        20m

l2.问题及解决方案

提不到DNA或产量很低取样量少:取样前半小时漱口。样品保存不当:确保样品新鲜有效。可能没加入ProteinaseK,或加入量不足,导致细胞裂解不完全,或者65℃孵育时间过短。   2.DNA未完全回收:减少上样量或增加磁珠量,确保样品充分吸附。确保磁珠与样品充分混匀,吸附时磁珠一直保持悬浮状态。3洗脱液中无/很少DNA:确保Washbuffer中加入相应的乙醇,用完后要密封保存,防止挥发。确保洗脱液中的盐浓度和pH。洗脱液用量不当:调整洗脱液体积。磁珠风干时间太长,磁珠未完全分散。4,DNA纯度不高,有污染RNA污染:检查RNase是否有问题,适当增加RNase的用量。洗杂不充分,含有杂质。若用去离子水洗脱DNA,A260/280比值会偏低,但并不表示纯度低。 上海定制试剂怎么样生物素标签纯化方案。

蛋白纯化试剂 Dextrin Beads 6FF是一种纯化带有麦芽糖结合蛋白(MBP)标签蛋白的亲和层析介质,具体性能见表1。MBP可促进连接蛋白的正确折叠,增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。Dextrin Beads 6FF可以一步纯化MBP融合蛋白,结合的融合蛋白可以用10mM麦芽糖进行温和洗脱,保护了标签蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位点特异性蛋白酶切除。问题及解决方案柱子反压过高 填料被堵塞按照第3部分进行树脂清洗。裂解液中含有微小的固体颗粒,建议上柱前使用滤膜 (0.22或 0.45μm) 过滤,或者离心去除。目的蛋白没有吸附目的蛋白未表达确保目的蛋白表达样品或缓冲液中存在一些干扰因素如非离子去污剂样品透析或用平衡液稀释细胞产生大量的淀粉酶影响结合力培养基中添加葡萄糖,抑制淀粉酶的表达融合蛋白使麦芽糖结合位点阻塞或扭曲,影响了目的蛋白的结合力更换载体柱子结合时间太短将样品与Dextrin Beads 6FF振荡孵育4度2小时或更长时间洗脱样品较杂目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制剂,如PMSF、EDTA等平衡/洗杂不充分增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂,如树脂太脏按照第3部分进行树脂清洗。

试剂篇:2,细胞碎片等不溶物用离心或过滤的方法除去。如果所要的蛋白主要集中在某一细胞组分,如细胞核、染色体、核糖体或可溶性细胞质等,则可利用差速离心的方法将它们分开,收集该细胞组分作为下步纯化的材料。如果碰上所要蛋白是与细胞膜或膜质细胞器结合的,则必须利用超声波或去污剂使膜结构解聚,然后用适当介质提取。粗分离当蛋白质提取液(有时还杂有核酸、多糖之类)获得后,选用一套适当的方法,将所要的蛋白与其他杂蛋白分离开来。一般这一步的分离用盐析、等电点沉淀和有机溶剂分级分离等方法。这些方法的特点是简便、处理量大,既能除去大量杂质,又能浓缩蛋白溶液。有些蛋白提取液体积较大,又不适于用沉淀或盐析法浓缩,则可采用超过滤、凝胶过滤、冷冻真空干燥或其他方法进行浓缩。常州天地人和试剂经销商。

蛋白纯化试剂ChelatingBeads6FF是以高度交联的6%琼脂糖凝胶为基质,配体为亚氨基二乙酸(IDA),结构如图1所示。ChelatingBeads6FF可以用于螯合各种金属离子,如Cu2+,Zn2+,Co2+,Ni2+和Fe3+,可根据金属离子对标签蛋白的结合力来选择需要螯合的金属离子。通常优先Ni2+,因为镍离子螯合填料可以很好的从各种表达体系中一步纯化his标签蛋白。Cu2+,Zn2+,结合力很强,可以用于纯化结合力弱的蛋白。Co2+和Fe3+对标签蛋白的特异性更强,纯度更高。带负电荷的强阴离子交换介质。浙江抗体纯化试剂哪里买

预制胶使用电泳槽如何操作?上海定制试剂哪里买

蛋白纯化试剂纯化流程5)依次使用3倍柱体积的平衡液和5倍柱体积的去离子水平衡填料,***再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4-30°C保存,防止填料被细菌污染。2.4SDS-PAGE检测将使用纯化产品得到的样品(包括流出组分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始样品使用SDS-PAGE检测纯化效果。3.在位清洗当填料使用过程中发现反压过高或者填料上面出现明显的污染时,需要进行在位清洗操作(Cleaning-in-Place,CIP)。建议按照下面操作去除填料上残留的污染物,如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。去除强疏水结合的蛋白,脂蛋白和脂类通过使用30%异丙醇清洗5-10个柱体积,接触时间为15-20分钟可以去除此类污染物。然后,再使用10倍柱体积的去离子水清洗。也可以选择使用含有去污剂的酸性或碱性溶液,清洗填料2倍柱体积。例如,含有0.1–0.5%非离子去污剂的0.1M醋酸溶液,接触时间为1–2小时。去污剂处理后,需要使用70%的乙醇清洗5个柱体积,以彻底去除去污剂。***使用10倍柱体积的去离子水清洗。上海定制试剂哪里买

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