蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:案例介绍,离子交换是蛋白纯化中的重要手段,即可以用于捕获阶段,也可以用于精纯阶段。预处理和装柱1.将超纯水与沉降胶按1:3比例悬浮,轻轻搅匀;2.将色谱柱固定到设备支架上,链接出口管道,从柱底端进口反向泵入超纯水,排除管道及筛板中的气泡,停泵,然后从出口端放出部分超纯水,保留1~2cm高度超纯水,封死出口端,然后正向冲洗进口端管道和适配器,排除筛板和管道中气泡;3.通过玻璃棒引流将悬浮胶导入色谱柱,在柱上端补充部分超纯水,搅匀,装上适配器;4.将柱出口端与色谱设备连接,以0.2MPa恒压装柱,装填至恒定的柱床高度,标记柱床胶面位置,关闭泵,松开适配器,降低适配器至胶面下2mm处,继续装填,待柱床高度稳定后,标记柱床胶面位置,降低适配器至柱上标记柱床位置下2mm。固定适配器,继续装填2~3柱体积;5.确定柱体积,测量柱高,计算柱体积及记录装柱时的比较大流速;蛋白纯化仪,蛋白纯化系统 ◆ Unique AutoPure®系统。天津蛋白纯化仪代理厂家
Autopure系列蛋白纯化仪系统配置清单:Autopure25系列:型号neAutoPure25-L1:输液泵:11二元梯度生物惰性输液泵●流速:范围:0.001-25000m/min流速精度:12流速精密度:0.54.压力:0-27.5MPa↑动态混合器:2ml,面板安装,方便更换。自动进样阀:2.1:自动进样阀,可软件反控支持Load/nect/Waste,22:1m定量环、280nm固定波长检测器3.1:280nm进口LED检测器,寿命:8000r3.2:噪声:+2x105Abs33:2mm流通池,四、电导率检测器:,4.1:范围:000-99999mS/cm,4.2:精度:0.02mS/cm或2%.五、蛋白纯化层析工作站(含品牌电脑,软件及通讯模块层析工作站软件)江西性能优良蛋白纯化仪支持 Column 和 ByPass 功能,可实现层析柱正向、反向冲洗的蛋白纯化仪。
◆UniqueCDSystem蛋白纯化仪软件功能●实时采集并显示仪器的色谱检测器信号、压力、流速、梯度、阀状态等数据。●Log日志中记录手动或方法操作、系统错误、警告灯信息,方便查看和操作追溯。●流路图可实时动态显示色谱的流路状态。●运行过程中,可以通过手动命令操作,例如修改流速、梯度、收集条件等,使仪器重新运行新的方法。●先进的积分算法,使得积分造成的误差降到**限度。●方法编辑管理采用先进的UI+脚本模式,编辑功能强大,使方法可以边解析边运行,方法可以即时修改。●报告管理模式含有药典的标准格式,并具有报告格式编辑功能,用户可以自由编辑并存储报告格式。●封闭式系统,具有用户管理权限、审计追踪、数字签名等功能,符合FDA21CFR,Part11/GLP/GMP等相关法规要求。●网络服务器数据库管理功能,数据可定期备份,有效的保证了数据的安全性。
以下是蛋白质纯化常用到的实验设备,jin供参考(15)、纯化系统高级的纯化系统了。推荐品牌:Unique Autopure 蛋白纯化系统。(16)、膜超滤器蛋白样品浓缩、缓冲液置换、以及药品级蛋白纯化时缓冲液的去内毒su用。(17)、蛋白电泳仪SDS-PAGE、Westblot用。(18)脱色摇床电泳染色、脱色用。(19)、制冰机破菌时冷却用。(20)、恒温培养箱融合蛋白酶切去除tag时恒温用,做ELISA时用。(21)、凝胶成像仪就是给电泳胶及WB拍照片用,要配照片打印机哦。就是一台数码相机,硬件各品牌没有本质差异,主要看那家的软件做的好,界面友好。(22)、电磁炉加热电泳样品。(23)、微波炉电泳考染脱色。加热水,溶解尿素、硫酸铵等。(24)、微量取样器就是qiang了。从1ul到5ml都要的。还有一种电动的,可以用刻度吸管。蛋白纯化仪的配套有哪些?
以下是蛋白质纯化常用到的实验设备,*供参考。(1)、超声波细胞破碎机适用于5-100g湿菌体超声破碎,实验室规模用。(2)、高压匀浆机大规模生产用,对菌体量无限制。破菌效果好,但要注意冷却。(3)高分散乳化机均匀悬浮菌体用,比搅拌快,均匀性好,特别适合于大规模生产。另外,大规模生产时缓冲液的配制很有用,可快速溶解、混匀。(4)、中空纤维超滤柱大规模生产时做菌体收集用,要配合大蠕动泵及压力表。(5)、高速冷冻离心机小试、中试菌体收集用,破菌后离心,包涵体溶解后离心、小规模离心超滤等。(6)、磁力搅拌器就是搅拌用了。缓冲液配制,包涵体溶解等。(7)、真空泵离心上清过滤、缓冲液过滤、样品过滤等。(8)、过滤器同真空泵配合使用。(9)、pH计缓冲液配制、样品pH调节用。(10)电导仪就是测定缓冲液及样品的电导了。(11)、纯水仪如果没有管道系统的纯水设备,那就必需要的了。至少也是要去离子水、双蒸水或三蒸水。(12)紫外可见分光光度计测定蛋白浓度。岛津(13)、核酸蛋白检测仪纯化时在线监测。(14)、蠕动泵简单纯化系统用、包涵体稀释复性。(15)、纯化系统高级的纯化系统了。推荐品牌:Unique Autopure 蛋白纯化系统。英赛斯蛋白纯化仪的上海经销商。河南蛋白纯化仪市场前景
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上海楚知生物Unique AutoPure®蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:常见问题分析二、纯化后的蛋白收率较低怎么办?调整样品pH,使样品pH与起始缓冲液pH保持一致;改变洗脱模式,如将线性梯度模式改变为阶段性梯度洗脱;改变洗脱方法,如将pH洗脱方法改为盐梯度洗脱方法;改变洗脱强度。三、样品过于粘稠怎么处理?样品过于粘稠可能是由于含有的蛋白太多,或者含有大分子量的核酸分子,通常有以下解决方法:增加裂解前稀释细胞所用体积;增加裂解时间,直至黏度下降,或者增加DNase和Mg2+的剂量;增加机械裂解细胞的效率;降低上样流速。天津蛋白纯化仪代理厂家
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