蛋白纯化仪蛋白纯化方法之离子交换技术:流动相的选择离子交换色谱的流动相必需是有一定离子强度的并对pH有一定缓冲能力的溶液。为了避免目的蛋白失活,使用缓冲液可稳定流动相的pH,使之在色谱过程中不发生明显变化,同时可稳定目的分子上的电荷量,保证色谱结果的重要性。选择缓冲液一般按照以下原则:阳离子交换剂应选用阴离子缓冲液,可用柠檬酸盐、磷酸盐、醋酸盐、甘氨酸盐等;阴离子交换剂应选用阳离子缓冲液,可用烷基胺、Tris、氨基乙醇胺、乙二胺、咪唑等;起始缓冲液的浓度应尽可能低(<100mmol/L)这样可以使色谱柱上更多的吸附分离物质;缓冲液应不含会影响被分离物质活性和溶解度成分,洗脱时尽量不采用pH梯度洗脱,色谱柱的选择,离子交换色谱通常选用粗短柱,即高径比小的色谱柱。典型的离子交换柱高度在5~20cm,高径比一般小于5。如果需要增加离子交换剂的体积,只能从增加柱的直径而不能增加其高度。如果是连续梯度洗脱,可以适当增加柱的长度。AKTA蛋白层析系统的蛋白纯化仪哪家有?甘肃官方授权经销蛋白纯化仪要多少钱
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蛋白纯化仪,蛋白纯化方法之凝胶过滤色谱1.凝胶介质的选择凝胶介质的选择主要是根据待分离的蛋白和杂蛋白的分子量选择具有相应分离范围的凝胶,同时还需要考虑到分辨率和稳定性的因素。比如,如果是要将目的蛋白和小分子物质分开,可以根据他们分配系数的差异,选用SephadexG-25和G-50;对于小肽和低分子量物质的脱盐,则可以选用SephadexG-10、G-15以及Bio-GelP-2或P-4;如果是分子量相近的蛋白质,一般选用排阻限度略大于样品中**高分子量物质的凝胶。具体凝胶过滤色谱介质应用
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上海楚知生物,蛋白纯化仪,蛋白纯化方法之凝胶过滤色谱,问题分析和解决方案1、色谱分离前如何净化样品在色谱分离前,对样品进行离心和过滤,离心能除去大部分块状物,如果离心后样品仍不清澈,可用滤膜过滤。由醋酸纤维薄膜或PVDF材料制成的滤膜能够非特异性的结合少量蛋白。2、溶液交换不彻底严格控制上样体积,上样体积不超过柱体积30%。若样品溶液体积较多,可以分多次上样,注意每次上样时间间隔,可根据电导色谱峰确定下一次上样时间。Unique AutoPure®蛋白纯化仪的价格。甘肃官方授权经销蛋白纯化仪要多少钱
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