聚丙烯酰胺凝胶电泳结果不正常现象和对策:1.指示剂前沿呈现两边向上或向下的现象。向上的“微笑”现象说明凝胶的不均匀冷却,中间部分冷却不好,所以导致凝胶中分子有不同的迁移率所致。这种情况在用较厚的凝胶以及垂直电泳中时常发生。向下的“皱眉”现象常常是由于垂直电泳时电泳槽的装置不合适引起的,特别是当凝胶和玻璃板组成的“三明治”底部有气泡或靠近隔片的凝胶聚合不完全便会产生这种现象。2.“拖尾”现象是电泳中常见的现象。这常常是由于样品溶解不佳引起的,克服的办法是在加样前离心,选用合适的样品缓冲液和凝胶缓冲液,加增溶辅助试剂。另一方法是降低凝胶浓度。电泳所需的仪器有:电泳槽和电源。青浦手机电泳质量
电泳液稳定性测定方法:一、适用范围:本标准适用于测试电泳液于长时间开放空气中的变化,并观察其稳定性。二、依据标准:EDTM-10《电着液稳定性测定法》。 三、仪器及材料: 1.电泳实验设备一套。2.搅拌器一台。3.试片若干。四、测定方法及步骤:1.将电泳液倒入电泳槽内,维持28±1℃。2.在特定搅拌速度下,维持涂料不深沉。3.连续搅拌,挥发物质蒸发后经纯水补充,使其能保持固成分在18-20%。4.一周进行一次电泳试验。电泳涂装是利用外加电场使悬浮于电泳液中的颜料和树脂等微粒定向迁移并沉积于电极之一的基底表面的涂装方法。松江手机电泳厂家区带电泳按支持物的物理性状不同。
电泳是指带电颗粒在电场作用下,向着与其电性相反的电极移动的现象。利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的技术称为电泳技术。它是由俄国莫斯科大学的斐迪南·弗雷德里克·罗伊斯(Ferdinand Frederic Reuss)于1807年较早发现的现象,已普遍用于分析化学、临床化学、药理学和免疫学等领域。电泳现象:在确定的条件下,带电粒子在单位电场强度作用下,单位时间内移动的距离(即迁移率)为常数,是该带电粒子的物化特征性常数。不同带电粒子因所带电荷不同,或虽所带电荷相同但荷质比不同,在同一电场中电泳,经一定时间后,由于移动距离不同而相互分离。电泳分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。
电泳槽是电泳系统的主要部分,根据电泳的原理,电泳支持物都是放在两个缓冲液之间,电场通过电泳支持物连接两个缓冲液,不同电泳采用不同的电泳槽.常用的电泳槽有:(1)圆盘电泳槽:有上,下两个电泳槽和带有铂金电极的盖。上槽中具有若干孔,孔不用时,用硅橡皮塞塞住.要用的孔配以可插电泳管(玻璃管)的硅橡皮塞。电泳管的内径早期为5~7mm,为保证冷却和微量化,现在则越来越细.(2)垂直板电泳槽:垂直板电泳槽的基本原理和结构与圆盘电泳槽基本相同。差别只在于制胶和电泳不在电泳管中,而是在块垂直放置的平行玻璃板中间。(3)水平电泳槽:水平电泳槽的形状各异,但结构大致相同。一般包括电泳槽基座,冷却板和电极。聚丙烯酰胺凝胶电泳和SDS电泳需要200~600V电压。
影响电泳分离的主要因素: 1.待分离生物大分子的性质。待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说,子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形,则其电泳迁移速度越快。2.缓冲液的性质。缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度,从而对其带电性质产生影响,溶液pH值距离其等电点愈远,其所带净电荷量就越大,电泳的速度也就越大,尤其对于蛋白质等两性分子,缓冲液pH还会影响到其电泳方向,当缓冲液pH大于蛋白质分子的等电点,蛋白质分子带负电荷,其电泳的方向是指向正极。为了保持电泳过程中待分离生物大分子的电荷以及缓冲液pH值的稳定性,缓冲液通常要保持一定的离子强度,一般在0.02-0.2,离子强度过低, 则缓冲能力差,但如果离子强度过高,会在待分离分子周围形成较强的带相反电荷的离子扩散层(即离子氛),由于离子氛与待分离分子的移动方向相反,它们之间 产生了静电引力,因而引起电泳速度降低。另外缓冲液的粘度也会对电泳速度产生影响。电泳中的电场强度是指每厘米的电位降。松江手机电泳厂家
电泳分开的距离与外加电场的电压与电泳时间成正比。青浦手机电泳质量
电泳分类:目前所采用的电泳方法,大致可分为3类:显微电泳,自由界面电泳和区带电泳.区带电泳应用普遍,区带电泳可分为以下几种类型:按支持物的物理性状不同,区带电泳可分为:(1)滤纸为支持物的纸电泳;(2)粉末电泳:如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳;(3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳;(4)缘线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳2.按支持物的装置形式不同,区带电泳可分为:(1)平板式电泳:支持物水平放置,是常用的电泳方式;(2)垂直板电泳:聚丙烯酰胺凝胶可做成垂直板式电泳。(3)柱状(管状)电泳:聚丙烯酰胺凝胶可灌入适当的电泳管中做成管状电泳.3.按pH的连续性不同,区带电泳可分为:(1)连续pH电泳:如纸电泳,醋酸纤维素薄膜电泳;(2)非连续pH电泳:如聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳。青浦手机电泳质量
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