乌克兰蓝通元非洲猪瘟检测技术

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，当下非洲猪瘟流行的主流毒株类型，主要是流行非洲猪瘟Ⅰ型毒株，Ⅱ型缺失毒株，及Ⅰ型/Ⅱ型的重组毒株，致病力相对较弱。

非洲猪瘟弱毒珠及缺失毒株主要临床特点有：无症状或症状轻微、传播隐蔽、间歇性排毒，应激后排毒等特点，不容易被监测到，等异常猪出现，病毒已成扩散局面，难以做到精细去除。

主要临床表现：母猪：不吃料或少吃料、流产（与蓝耳病症状相似）、关节疼痛、多发前肢瘫痪，站立不起，皮肤出现坏死斑疹，死亡等。保育育肥猪：不吃料或少吃料、呼吸困难（与蓝耳病症状相似）、关节疼痛、皮肤发红，皮肤坏死斑疹，死亡等。 非洲猪瘟弱毒活疫苗虽然在实验室条件下攻毒表现出保护，但是临床使用存在毒力返强，与野毒株重组的风险。乌克兰蓝通元非洲猪瘟检测技术

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟阳性场采样检测方案如下：1、首头检测到抗原（核酸）阳性异常猪时及时淘汰同槽或周边密接猪群，离开猪圈后同时检测抗原抗体（P30/P54）。2、快速排查阳性猪群14天内的猪流、人流、物流情况，并采样检测、消毒。3、爆发后采集所有公猪血样、咽拭子、栏内拭子进行抗原（核酸）抗体检测，如果有异常猪或阳性公猪，排查1个月内配种、查情记录，并对相应母猪采样（三根棉签）检测。如果外购猪精，需要对留样进行排查。4、当猪群出现不规律爆发点时，对次密猪群进行“一天两采”（或两次不超12小时，可混样），连续检测3天抗原（核酸），淘汰阳性猪。5、阳性猪群淘汰后，连续稳定14天后，轮转怀孕母猪上产床前母猪检测抗原（核酸）抗体，阴性后轮转。6、分娩当天，对异常母猪采咽拭子、血，检测抗原、抗体；断奶后按5%比例检测抗体。7、稳定一个月后，全群母猪普检P72抗体，间隔15天再普检一次P72抗体，淘汰抗体阳性猪；稳定三个月后停止。乌克兰蓝通元非洲猪瘟检测技术猪群发现不吃料猪只，及时采样，建议采猪栏的环境拭子和口鼻拭子，进行PCR检测，排除非洲猪瘟病毒。

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。

安全引种的全链条服务复养成功的关键一环是引入安全的猪群。

引种是一套系统工程，八方同创为此提供可靠的引种方案，服务涵盖根据猪场的生产硬件条件（定位栏数量、产床数量、保育舍数量等），猪舍布局（自繁自养还是分点饲养），生产工艺（批次化管理）设计引进后备母猪的体重和数量，做到利益比较大化的引种设计。种猪源的健康评估（非洲猪瘟、蓝耳病、伪狂犬、PEDV双阴性）、运输路线的风险规划、运猪车辆的严格检测到入场后的隔离观察。通过全链条的生物安全管控，确保新引入的猪群不会带来新的风险，保障复养猪场能够稳健起步，走向持续生产。 非洲猪瘟早发现靠”吹哨人“，场内一线工作人员观察到异常猪及时吹哨，另外一个是检测员，阳性结果吹哨。

非洲猪瘟病毒的初级复制发生在离病毒进入点相近的淋巴结的单核细胞和巨噬细胞中。因此，在经口或口鼻暴露的情况下，扁桃体和下颌淋巴结的单核细胞和巨噬细胞首先受累。随后，病毒通过血液和/或淋巴系统传播到次级复制位点，如淋巴结、骨髓、脾脏、肺、肝和肾。大多数非洲猪瘟病毒分离株与红细胞膜结合，并在阳性猪中引起红细胞吸附。然而，一些分离株不诱导红细胞吸附。虽然非洲猪瘟病毒主要在髓单核细胞中复制，但它也在内皮细胞、肝细胞、肾小管上皮细胞和中性粒细胞中复制。普遍认为，髓单核细胞的损坏是非洲猪瘟发病机制的关键因素。此外，非洲猪瘟病毒通过调节宿主细胞因子引起免疫抑制，导致过度的组织炎症和细胞凋亡。此外，髓样细胞的破坏导致细胞成分（即危险信号）的释放。当单核细胞/巨噬细胞被侵害时，它们分泌多种介质，包括促炎细胞因子，如白细胞介素-1、IL-6和肿瘤坏死因子α（TNF-α）。这些细胞因子能够触发急性期反应、炎症、内皮细胞受损和细胞凋亡。TNF-α起关键作用，因为它能够诱导血管舒张和通透性增加并调节血管内皮细胞的受损状态（促凝/抗凝）。此外，TNF-α参与细胞凋亡的调节。非洲猪瘟控制后，复产前，八方同创建议对病毒的传入、扩散进行复盘，然后查缺补漏、猪场改造、人员培训。东帝汶中小型养殖场非洲猪瘟诊断试剂

八方同创提醒：非洲猪瘟病毒潜伏期通常为4至19天，弱毒株的潜伏期更长，甚至超过1个月。乌克兰蓝通元非洲猪瘟检测技术

非洲猪瘟的传播媒介除已知的生物媒介（即钝缘蜱属软蜱）外，其他吸血节肢动物或昆虫，特别是叮咬蝇，被建议作为机械媒介。实验证明，厩螫蝇（Stomoxyscalcitrans）可通过叮咬和摄入机械传播非洲猪瘟病毒。在非洲猪瘟受影响地区采集的吸血蝇（厩螫蝇和虻）中也检测到非洲猪瘟病毒DNA(Olesen,Stelder,etal.2023)。然而，这些蝇类在田间传播中是否起重要作用仍有待确定。近期的实验室研究表明，吸血昆虫可以以温度依赖的方式携带活病毒一段时间，例如在凉爽温度下长达7天。在家猪和欧亚野猪中，非洲猪瘟潜伏期通常为3-7天，取决于病毒特性、宿主相关因素和暴露途径。病毒排泄可能在潜伏期开始，在观察到临床症状之前，但会随着发烧开始而增加。值得注意的是，分泌物和排泄物（如唾液、粪便、尿液和生殖道分泌物）中的排泄通常较低且间歇性，除非发生出血。在大多数情况下，非洲猪瘟具有中等传染性，但当涉及非洲猪瘟病毒污染的56424.4发病机制血液（鼻出血、血性腹泻或伤口）时具有高度传染性。此外，**中病毒排泄发生在***早期，通过人工授精（ArtificialInsemination,AI）传播可导致疾病传播(Friedrichs,Reicks,etal.2022)。乌克兰蓝通元非洲猪瘟检测技术

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