中国香港猪群非洲猪瘟消毒机构

非洲猪瘟病毒基因组长度在170至193kb之间变化，包含150-167个开放阅读框。已鉴定出超过68种病毒蛋白，但其中一些的功能仍未知。基因组由一个约125kb的保守中心区域和两个包含五个多基因家族（MultigeneFamilies,MGFs）的可变末端组成(Yáñezetal.1995)。在MGF基因内发生长达20kb的复制区域缺失和插入，表明这些区域可能有助于产生抗原变异，从而帮助非洲猪瘟病毒逃避宿主免疫系统。历史上，非洲猪瘟病毒基因分型基于B646L基因（编码p72蛋白）的部分测序(Achenbachetal.2017;Quemboetal.2018)。这种方法通过分型基因组的其他部分得到辅助，例如编码p54、p40或CD2v的部分，或对基因间区进行测序(Gallardo,Fernandez-Pinero,etal.2014)。虽然单独对p72进行基因分型无法完全阐明每个地区分离株的变异性，但它仍是对不同田间分离株进行流行病学追踪易得且经济的方法(Dinhobletal.2024)。在条件允许的情况下，使用下一代测序技术生成全基因组比较适合用于深入了解基因组流行病学和病毒进化(J.Forth,L.Forth,etal.2019;J.Forth,Calvelage,etal.2023)。八方同创的生物安全审计服务，就是根据“五横八纵”的交叉点进行查缺补漏，提出改进意见，人员培训。中国香港猪群非洲猪瘟消毒机构

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，病毒灭活方法非洲猪瘟病毒可被有机溶剂、洗涤剂、氧化剂（如次氯酸盐、苯酚）及商业消毒剂灭活，灭活效果受暴露时间和温度影响。具体灭活方式包括：暴露于2.3%的氯、3%的邻苯基苯酚或含碘化合物中30分钟，可灭活病毒。其他有效灭活处理包括使用福尔马林、氢氧化钠、β-丙内酯、甘油醛或乙酰亚乙基亚胺（《非洲猪瘟科学报告》，欧洲食品安全局，2009年）。肥皂、洗涤剂和碱类物质可有效对动物圈舍、机械设备、衣物、交通工具及人类居住区域进行消毒；飞机消毒推荐使用卫可（Virkon®）等消毒剂。受病毒污染的饲料、污水和粪便应采用掩埋或焚烧的方式处理。在4°C（39°F）条件下，用1%的氢氧化钠或氢氧化钙处理受污染猪粪浆3分钟，或用0.5%的氢氧化钠或氢氧化钙处理30分钟，可灭活病毒（特纳、威廉姆斯，1999年）。蜱虫根除推荐使用杀虫剂，如有机磷酸盐类和合成拟除虫菊酯类杀虫剂。泰国种公猪非洲猪瘟饲养管理八方同创总结：很多常用消毒剂对非洲猪瘟病毒有效，如3%烧碱戊二醛、过硫酸氢钾、二氯异氰尿酸钠等有效。

    物理屏障与化学利刃——切断病毒传播链为将病毒拒之门外。生物安全是防控非洲猪瘟的有效措施，八方同创强调“物理隔离”可以做到“不接触、不交叉”，阻断非洲猪瘟接触性传播链条。难以避免需要接触和交叉的环节，需要强调“彻底消毒”，选择有效消毒剂可以降低接触传播风险。因此，八方同创的老师采用“物理隔断”与“化学消毒”双管齐下，指导猪场在周边设立有效的物理隔离区，严防外来动物与未经批准的人员闯入。同时，引入经过验证的高效消毒剂与先进消毒设备，制定科学的消杀流程，定期对场区、道路、设施等进行彻底处理。这套组合拳旨在构建坚实的防御工事，有效切断病毒通过接触、车辆、物品等途径传播的可能性，给诸多猪场成功防住非洲猪瘟提供有力保障。

非洲猪瘟疫苗研发历程艰难，主要在于缺乏明确的保护相关物、抗体的中和能力有限以及病毒的复杂性，都导致了开发有效疫苗的挑战。

多年的研究努力在非洲猪瘟病毒疫苗开发方面取得了有希望的进展，但商业化的疫苗仍未普及，并且报告了当前疫苗在田间使用后出现问题，例如在越南。基于康复动物的血清学有良好的反应，学者们将重组的靶向结构蛋白（如p30、p54、p72、pp62和CD2v）疫苗、DNA疫苗和病毒载体疫苗等作为非洲猪瘟病毒疫苗开发的重点。许多项目利用计算机预测的抗原通过各种载体系统表达，但大多数方法显示出极小或无保护效力。

近期，一种包含8种非洲猪瘟病毒抗原的组合，通过复制缺陷型人腺病毒5（初免）和改良痘苗病毒安卡拉株（加强）给药，在非洲猪瘟病毒基因型I攻毒后保护猪免于死亡。该研究方法在抗原选择方面具有前景，并支持DIVA兼容的亚单位疫苗可提供一定程度保护的概念。不幸的是，未识别出明确的保护指标，因为所有动物都发病并表现出病毒血症。此外，尝试用基因型II毒株攻读复制这些结果未成功。因此，仍然缺乏有说服力的载体或亚单位疫苗候选株。 猪场实验室的建立彻底改变了非洲猪瘟疫情的防控逻辑，使防控工作从被动处置转向主动监测。

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟入侵后精细防控的采样方案如下：1、猪舍内部环境，生产人员着防疫服、防疫帽、手套换鞋进入猪舍后，先采样，风机口、开关、料槽、栏杆、猪栏隔离墙内侧近地面、水嘴、窗户、工具手柄等；2、人员：阳性栋和高风险栋舍的人员，每天坚持采样。工作完成后，在洗澡前，饲养人员采集个人样（手、面部、膝部、头发、鞋底、眼镜、手机等），主要监控检测是否存在有病毒被携带传播的风险；3、异常猪只：不吃料或者半吃料、精神呆滞、呕吐、拉稀、便血。采样为：内环境样（脏棉签）+深咽拭子（白棉签）+尾根血（红棉签）；4、高风险猪群：母猪（定位栏、产房）采用“红白灰”三根棉签法：内环境样（脏棉签）+深咽拭子（白棉签）+尾根血（红棉签）；“安全第一、能采尽采”原则，咽拭子采集困难的母猪可以放弃，确保安全操作。保育或育肥猪：棉绳（唾液）+环境样；规模化猪场从2020年开始配备实验室，开展非洲猪瘟病毒的自检，至2023年底，这一比例已达到90%。中国母育猪非洲猪瘟公司

非洲猪瘟控制后，复产前，八方同创建议对病毒的传入、扩散进行复盘，然后查缺补漏、猪场改造、人员培训。中国香港猪群非洲猪瘟消毒机构

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 中国香港猪群非洲猪瘟消毒机构

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