磁珠法核酸提取过程中的常见误区--样品取用越多，提取效果越好在样本不够新鲜或者核酸含量本身就很少的情况下，往往核酸提取效果不好，很多老师就会采用多取样本的方式增加核酸提取量。但简单地增加样本取样量，有时会引入过多的杂质，超出裂解液裂解能力，也会使提取效率降低，所以并不推荐通过简单的增加样本取样量的方...

日本药典JPXVⅢ〈G3-14-170〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、可比性。其中对于可比性的描述及要求如下：可比性研究主要包括核酸扩增法与方法A和/或方法B的检测限的对比。此外，专属性(多种的支原体检测，假定的假阳性结果)也应该在对比中。检测限的...

随着基因检测、个性化给药、产前诊断等的普及，在生物行业各领域都追求高通量、自动化的如今，传统核酸提取方法的局限愈来愈明显，而磁珠法核酸提取的优势则愈来愈明显：R能够实现自动化、大批量操作；R不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂，安全无毒完全符合现代环保理念；R与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度...

美国药典USP40〈1223〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括专属性、检测限（LOD）、耐用性、重现性。其中对于专属性的定义及验证方法如下：定义：替代性定性微生物方法的特异性定义为其检测特定于该技术的一系列挑战微生物的能力。“微生物范围”可以定义为**对患者或产品风险的有限数...

如今，实时荧光定量PCR(qPCR)是一种优先的支原体检测方法，因为它准确、灵敏且省时。与常规PCR不同，qPCR允许实时观察支原体DNA的DNA扩增，因为特异性引物在荧光探针存在的情况下与其靶序列结合，从而导致DNA扩增和荧光增强。此外，qPCR比常规PCR更具特异性和敏感性。与标准PCR...

核酸提取时，加标回收率的定义及注意事项：加标回收率是指在测定样品的同时,于同一样品的子样中加入一定量的标准物质进行测定,将其测定结果扣除样品的测定值,以计算回收率。加标回收设置的注意事项：①同一样品的子样取样体积必须相等;②各类子样的测定过程必须按相同的操作步骤进行。③加标量不能过大,一般为待测物含...

中国药典ChP2020〈9201〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、重现性。其中对于专属性的定义及验证方法如下：相同的样品在正常的实验条件(如实验地点、实验人员、仪器、试剂的批次等)发生变化时，所得检验结果的精密度。重现性可视为微生物检验方法在检验结果...

南京正扬生科科技有限公司自主研发的支原体检测试剂盒包括支原体DNA提取试剂盒（磁珠法）和支原体DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法），支原体DNA提取试剂盒采用特别修饰的氧化硅纳米磁性微球，在独特缓冲体系和外加磁场的作用下，可从复杂生物样本中提取微量DNA并纯化得到高纯度DNA。与本公司自主研发的支...

磁珠法核酸提取裂解液的作用原理：磁珠法核酸提取是以纳米生物磁珠为载体的一种新型核酸提取技术，核酸分子可与磁珠表面的硅羟基发生特异性识别与结合，在外部磁场的作用下发生聚集或分散，彻底摆脱传统核酸提取过程中离心、抽取上清液等手工操作流程，从而实现核酸的自动化提取。广泛应用于临床疾病诊断、输血安全、法医学...

用qPCR法进行支原体检测时，出现扩增曲线复孔间荧光信号值降低及复孔间扩增曲线重复性差的原因可能是什么？复孔间部分曲线荧光信号值降低的现象比较常见，通常与反应管内存在气泡相关，随反应温度升高，气泡破裂导致荧光信号值降低。上机前需仔细检查反应管内是否有气泡残留。另外，针对加样误差引起的复孔间重复性差，...

美国药典USP40〈1223〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括专属性、检测限（LOD）、耐用性、重现性。其中对于定量限（LOD）的定义及验证方法如下：一种备用微生物方法的检测限(LOD)定义为在规定的实验条件下，在规定体积的样品中可以检测但不一定定量的微生物的蕞低数量。这应与在抗 ...

我国药典规定的支原体检测方法为培养法和指示细胞染色法。但这些方法也存在一些不尽人意之处，如所需时间较长，有的操作复杂等。《中国药典2020年版3301支原体检测法》中指出：除培养法和DNA染色法外，也可采用经国家药品检定机构认可的其他方法，对支原体进行检测。由于支原体检测存在必要性，如何尽可能提高检...

日本药典JPXVⅢ〈G3-14-170〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、可比性。其中对于可比性的描述及要求如下：可比性研究主要包括核酸扩增法与方法A和/或方法B的检测限的对比。此外，专属性(多种的支原体检测，假定的假阳性结果)也应该在对比中。检测限的...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的rcAAV复制型腺相关病毒检测试剂盒有哪些优点？①试剂盒经过独特的设计开发，可以防止PCR产物污染；②产品检测灵敏度高；③重复性好，同一样品重复检测20次，CV＜15%；④检测时间短，从样品提取纯化到出结果只需2.5h；⑤适应性强，针对不同机型，不同实验室条...

PCR相关实验中污染问题时常发生，常见的有以下几种污染类型：扩增产物的污染、天然基因组DNA污染、试剂的污染以及标本间的污染。扩增产物污染是蕞严重、蕞难以处理的的污染类型，由于一旦发生PCR产物污染，实验室必须停止实验，直至污染被完全***为止，PCR产物污染短时间内很难消除，一般需要2-4...

核酸提取的质量标准之紫外光谱法：即使是蕞小的样品（1~2L）也可以用紫外光谱法进行测量。DNA、RNA和单个核苷酸和寡核苷酸在260纳米处吸收紫外线。在1厘米的比色皿中，1.0的A260相当于50μg/mLDNA和40μg/mLRNA。A260/A280比率提供了关于分离的核酸纯度的信息。纯的DNA...

我国药典规定的支原体检测方法为培养法和指示细胞染色法。但这些方法也存在一些不尽人意之处，如所需时间较长，有的操作复杂等。《中国药典2020年版3301支原体检测法》中指出：除培养法和DNA染色法外，也可采用经国家药品检定机构认可的其他方法，对支原体进行检测。由于支原体检测存在必要性，如何尽可能提高检...

中国药典ChP2020〈9201〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、重现性。其中对于专属性的定义及验证方法如下：检测样品中可能存在的特定微生物种类的能力。当替代方法以微生物生长作为判断微生物是否存在时，其专属性验证时应确认所用培养基的促生长试验，还应考...

我国药典规定的支原体检测方法为培养法和指示细胞染色法。但这些方法也存在一些不尽人意之处，如所需时间较长，有的操作复杂等。《中国药典2020年版3301支原体检测法》中指出：除培养法和DNA染色法外，也可采用经国家药品检定机构认可的其他方法，对支原体进行检测。由于支原体检测存在必要性，如何尽可能提高检...

CAR-T细胞的微生物安全风险可能涉及细菌、***、支原体、外来病毒和来自载体生产的具有复制能力的病毒的污染。微生物安全问题需要高度关注，因为在生产过程中很容易发生微生物污染，而且蕞终的细胞产品无法净化。CAR-T细胞的微生物安全主要通过对生产材料的严格检测、按照CGMP要求严格控制生产过程、对...

基因***产品是近年来国内外药物研发的热点，通常由各种病毒或非病毒载体携带***基因组成。在病毒载体中，慢病毒载体(LVs)由于其有效的将基因整合进靶细胞基因组、稳定的基因表达等特点，被认为是蕞有希望的基因***载体。考虑到慢病毒对人的病原性及相关的安全性，所使用的慢病毒载体均为复制缺陷型载体...

日本药典JPXVⅢ〈G3-14-170〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、可比性。其中对于专属性的描述及要求如下：专属性是指在样本中能够明确检测到目标核酸存在的能力。核酸扩增法的专属性依赖于引物/探针的选择和测试条件的严谨性(包括扩增和检测步骤)。选择...

随着我国生物药以及细胞***相关产业的发展，相关的法律法规也在不断健全。支原体检测就是其中必不可少的一项。准确进行支原体检测，是避免外源因子污染，保证产品质量的重要质控手段。根据我国药典的相关规定，如下领域需要进行支原体检测：主细胞库、工作细胞库、病毒种子批、对照细胞以及临床***、生产...

日本药典JPXVⅢ〈G3-14-170〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、可比性。其中对于专属性的描述及要求如下：专属性是指在样本中能够明确检测到目标核酸存在的能力。核酸扩增法的专属性依赖于引物/探针的选择和测试条件的严谨性(包括扩增和检测步骤)。选择...

rcAAV复制型腺相关病毒检测过程中，qPCR反应体系配制环节有哪些注意事项？①qPCR的整个操作要低温环境进行，防止模板的降解，试剂避免反复冻融。②配制反应体系前试剂要充分混匀，除了模板外的反应体系要统一配制，然后再分配至qPCR管中，配制的时候考虑到操作或耗材带来的损耗需要多配若干个反应所需体系...

核酸提取时，加标回收率的定义及注意事项：加标回收率是指在测定样品的同时,于同一样品的子样中加入一定量的标准物质进行测定,将其测定结果扣除样品的测定值,以计算回收率。加标回收设置的注意事项：①同一样品的子样取样体积必须相等;②各类子样的测定过程必须按相同的操作步骤进行。③加标量不能过大,一般为待测物含...

慢病毒载体是以人类免疫缺陷Ⅰ型病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV-1）为基础发展起来的基因医治载体，属于逆转录病毒家族，又区别于一般的逆转录病毒载体，比逆转录病毒载体具有更强的***能力，具有容纳外源性目的基因片段大、稳定整合、持久表达、免疫反应小等优点，是常用的...

中国药典ChP2020〈9201〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、重现性。其中对于专属性的定义及验证方法如下：检测样品中可能存在的特定微生物种类的能力。当替代方法以微生物生长作为判断微生物是否存在时，其专属性验证时应确认所用培养基的促生长试验，还应考...

磁珠法核酸提取过程中的常见误区--磁珠越多，提取效率越好有很多老师喜欢在提取效果不佳的时候，增加磁珠的用量，认为磁珠多加一点，就能吸上更多的核酸，不得不说这种想法是不可取的。磁珠的主要特点是既可以分散于液体中，也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离，任何试剂体系，磁珠和液体的比例都应该是有一定阈...

南京正扬生科科技有限公司自主研发的支原体检测试剂盒包括支原体DNA提取试剂盒（磁珠法）和支原体DNA检测试剂盒（PCR-荧光探针法），支原体DNA提取试剂盒采用特别修饰的氧化硅纳米磁性微球，在独特缓冲体系和外加磁场的作用下，可从复杂生物样本中提取微量DNA并纯化得到高纯度DNA。与本公司自主研发的支...