美国药典USP40〈1223〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括专属性、检测限（LOD）、耐用性、重现性。其中对于耐用性、重现性的定义如下：耐用性：一种方法不受方法参数(如试剂体积、孵育时间或环境温度)微小但有意变化影响的能力，该方法在正常使用过程中可表明其可靠性。对耐用性的衡量不是对...

随着**相关信息的传播，许多先前不为大众所知的诊断行业专业名词逐渐变得家喻户晓，如核酸检测、试剂盒、咽拭子、假阴性等等。我们在进行核酸检测的时候，通常需要在检测之前经历核酸提取这一步骤，简单来说就是将病毒的核酸从我们采集的样本当中提取出来，以用于后续实验。通过对磁珠进行一定的包被（如硅基、氨...

用qPCR法进行支原体检测时，出现扩增曲线末尾起跳的原因可能是什么？①阴性质控或无模板对照曲线末尾出现起跳情况，考虑环境存在污染所致，建议对实验环境做好控制，如使用低吸附带滤芯抢头和低吸附ep管，保证实验分区（样品处理区、试剂保存及配制区、PCR扩增区）、用DNA清除剂处理环境等。②待测样品曲线末尾...

在进行支原体检测之前，进行支原体核酸提取的目的是为了从样品中纯化和富集支原体的DNA，以便进行后续的检测和分析。支原体是一类细小的细菌样微生物，其基因组含有DNA。通过对支原体DNA的提取，可以获得纯净的DNA样本，有助于准确、敏感地检测支原体的存在和进行进一步的分子分析。通过对支原体DNA进行提取...

宿主细胞残留DNA检测试剂盒在重组蛋白类医疗器械领域的应用。已经实施的行业标准YY/T1888-2023《重组人源化胶原蛋白》中加强了对重组蛋白类医疗器械的质量控制。重组蛋白类医疗器械产品是利用基因重组技术，通过工程菌或工程细胞如：E.coli、酵母、CHO细胞等发酵表达生产目的蛋白。与动物源产品相...

支原体(mycoplasma)是目前发现的蕞小的原核生物，据统计约15-35%的细胞被支原体污染。支原体污染会改变宿主细胞的结构与功能，易致实验结果不稳定，须对培养细胞定期进行支原体检测。南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的支原体检测试剂盒利用Taqman荧光探针原理，于定性检测主细胞库、工作细胞...

磁珠法核酸提取产品，磁珠如何与核酸结合实现提取功能？核酸作为一种生物大分子，之所以能够在水溶液中稳定分散不沉淀，是由于三种非共价作用力的存在：（1）静电相互作用（2）范德华力（3）氢键。核酸分子具有多个磷酸基团，呈现高度负电性，分子间互相排斥从而避免发生团聚。此外，核酸分子在水溶液中通过氢键与范德华...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的支原体检测试剂盒在PCR试剂配制及加样上机环节有哪些注意事项？①避免在不必要的情况下冻融试剂盒中的试剂，检测试剂盒需避光储存于-18℃以下；②本试剂盒所用的试剂不能随意替换，以免影响检测效果。不同批号的试剂盒各成分也不可相互混用；③严格区分质控品和反应试剂的使用...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的全自动核酸提取仪是针对生物制品核酸提取的技术平台，内置专业优化的前处理程序，配套本公司的自动化前处理试剂盒和配套耗材，只需一键操作即可完成各类生物材料和制品中的宿主细胞、微生物、病毒因子等各类微量DNA/RNA的提取纯化。只需26min即可完成样品微量核酸的提取...

传统核酸提取方法和磁珠法核酸提取的优缺点比较：传统核酸提取法磁珠法技术简单高质量、高通量手工提取自动化流程操作繁琐、费时费力免去了复杂的人工提取不适合大量样品核酸提取减少酚类、氯仿等有机试剂对操作人员伤害不适合临床分子诊断极大满足如今对核酸提取效率的需求 随着基因检测、个性化给药、产前诊断...

支原体是实验室中常见的污染细胞的原核生物，据统计约有15%-35%的细胞被支原体污染。支原体会改变宿主细胞的结构和功能等一系列特征，造成实验结果不正确；干扰细胞代谢和生长，改变核酸合成，影响细胞抗原性，导致染色体改变，干扰病毒复制以及模仿病毒的作用。因此，每一株外来细胞在进入实验室之前，都应进行支原...

南京正扬生物的宿主细胞残留核酸提取试剂盒手工操作步骤：1.向离心管（自备）中加入100μL样本，做好标记和记录。2.加入25μL裂解液1，充分涡旋混匀25s后，瞬时离心。℃消化30min。4.待样本消化完毕后，瞬时离心，待用。5.加入200μL裂解液结合液，涡旋混匀10s，瞬时离心。6....

慢病毒载体是以人类免疫缺陷Ⅰ型病毒（humanimmunodeficiencyvirus，HIV-1）为基础发展起来的基因医治载体，属于逆转录病毒家族，又区别于一般的逆转录病毒载体，比逆转录病毒载体具有更强的***能力，具有容纳外源性目的基因片段大、稳定整合、持久表达、免疫反应小等优点，是常用的...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的Vero宿主细胞残留DNA检测试剂盒利用Taqman荧光探针原理，定量检测各种生物制品及药品的中间品、半成品和成品中残留的Vero宿主细胞DNA，产品具备检测快速、操作简单、特异性强、检测灵敏度高、稳定性好、能防止PCR产物污染等特点。蕞低检测限可以达到fg...

核酸提取的质量标准之紫外光谱法：即使是蕞小的样品（1~2L）也可以用紫外光谱法进行测量。DNA、RNA和单个核苷酸和寡核苷酸在260纳米处吸收紫外线。在1厘米的比色皿中，1.0的A260相当于50μg/mLDNA和40μg/mLRNA。A260/A280比率提供了关于分离的核酸纯度的信息。纯的DNA...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产了一款E.coli宿主细胞残留DNA检测试剂盒，采用qPCR-荧光探针法，在qPCR技术的基础上利用荧光探针原理，定量检测样本中E.coli残留DNA，简化qPCR反应操作的反应液配置时的操作步骤，检测快速，专一性强，性能可靠，蕞低检测限可以达到fg水平。实验...

磁珠法核酸提取过程中的常见误区--某一种磁珠好，就应该在所有试剂配方中使用效果都好磁珠的种类是多种多样的，粒径大小不同，分散性不同，磁响应时间不同，包被基础基质不同，外层修饰官能团不同，包被密度不同，官能团臂长不同，会导致磁珠特性千差万别。所以不同磁珠所适应的实验和体系也是不同的。就像同样是核酸提取...

核酸提取的质量标准之紫外光谱法：即使是蕞小的样品（1~2L）也可以用紫外光谱法进行测量。DNA、RNA和单个核苷酸和寡核苷酸在260纳米处吸收紫外线。在1厘米的比色皿中，1.0的A260相当于50μg/mLDNA和40μg/mLRNA。A260/A280比率提供了关于分离的核酸纯度的信息。纯的DNA...

磁珠法核酸提取过程中的常见误区--试剂使用的越多，提取效果越好裂解效果不好?多加点裂解液。洗涤效果不好?多加点洗涤液。这是很多客户在使用试剂盒中的惯性思维。但是对于磁珠法而言，每增加一部分液体体积，就减少了更多的磁珠碰撞几率，而降低磁珠碰撞几率，会导致吸附率的大幅度下降。所以很多时候，虽然增加裂解液...

磁珠法核酸提取常见问题之核酸纯度差：提取纯化所得核酸纯度差的可能原因：①样品裂解、消化不充分，提取纯化液中所含的杂质较多；②微球分散性不好，导致洗涤环节无法将杂质充分洗弃；③微球吸附能力太强，不仅吸附核酸，还能吸附大量蛋白、脂质、多糖等杂质。提取纯化所得核酸纯度差的解决办法：①优化试剂裂解液配方，使...

磁珠法核酸提取过程中的常见误区--磁珠越多，提取效率越好有很多老师喜欢在提取效果不佳的时候，增加磁珠的用量，认为磁珠多加一点，就能吸上更多的核酸，不得不说这种想法是不可取的。磁珠的主要特点是既可以分散于液体中，也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离，任何试剂体系，磁珠和液体的比例都应该是有一定阈...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的RCL基因拷贝数检测试剂盒（RT-PCR荧光探针法）、RCR基因拷贝数检测试剂盒（RT-PCR荧光探针法）、rcAAV-5/N检测试剂盒（PCR-荧光探针法）既适用于基于细胞培养法对复制型病毒的qPCR法的检测，也适用于对无细胞基质的病毒收获液（上清液）等样品的...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的支原体检测试剂盒在PCR试剂配制及加样上机环节有哪些注意事项？①避免在不必要的情况下冻融试剂盒中的试剂，检测试剂盒需避光储存于-18℃以下；②本试剂盒所用的试剂不能随意替换，以免影响检测效果。不同批号的试剂盒各成分也不可相互混用；③严格区分质控品和反应试剂的使用...

rcAAV复制型腺相关病毒检测过程中，标准品稀释环节有哪些注意事项？①用来做稀释的耗材建议使用1.5mL离心管，容量太大的耗材会增加DNA的吸附作用，容量太小易导致混匀不充分。②为了做出更好的线性，进行倍数稀释的时候要吸取较大体积标准品溶液（避免用1μL标准品+9μL稀释液这样的小体积体系进行稀释）...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的rcAAV复制型腺相关病毒检测试剂盒有哪些优点？①试剂盒经过独特的设计开发，可以防止PCR产物污染；②产品检测灵敏度高；③重复性好，同一样品重复检测20次，CV＜15%；④检测时间短，从样品提取纯化到出结果只需2.5h；⑤适应性强，针对不同机型，不同实验室条...

磁珠法核酸提取过程中的常见误区--样品取用越多，提取效果越好在样本不够新鲜或者核酸含量本身就很少的情况下，往往核酸提取效果不好，很多老师就会采用多取样本的方式增加核酸提取量。但简单地增加样本取样量，有时会引入过多的杂质，超出裂解液裂解能力，也会使提取效率降低，所以并不推荐通过简单的增加样本取样量的方...

如何评估磁珠法核酸提取产品的提取效果，可以从以下角度进行相关产品的性能评估：Purity（纯度），具体而言就是磁珠提取后的核酸中含有多少非核酸类的杂质残留，如蛋白、盐、多糖等。该指标通常用吸光度比值（A260/A280和A260/A230）来衡量。Quality（质量），磁珠提取后的核酸尤其是较长的...

各国药品监督管理机构对生物制品中宿主细胞残留DNA检测的要求：各国药品监督管理机构对生物制品中宿主细胞残留DNA的态度谨慎且明确，要求各制药企业建立详细可行、灵敏度高的检测方法，用于验证药品的纯化过程可以去除残留DNA，并对终产品的产品放行严格把关，避免携带外源DNA的药品流入市场。与此同时，残...

qPCR法宿主细胞残留DNA检测的原理：PCR反应过程中可通过荧光标记的特异性探针检测PCR产物量。带有一对荧光分子的探针与样品中DNA通过碱基互补配对的原则结合，随着PCR反应的进行，Taq聚合酶合成DNA，同时沿5’-3’方向水解DNA探针，一对荧光分子随着探针的水解而分开，发出荧光信号。通过连...

qPCR法支原体检测试剂盒会出现4种检测结果，具体分析如下：①FAM通道（支原体）Ct值＜cutoff值，VIC通道（IC）Ct值＜cutoff值，检测结果为支原体阳性；②FAM通道（支原体）Ct值＞cutoff值，VIC通道（IC）Ct值＜cutoff值，检测结果为支原体阴性；③FAM通道（支原体...